科研利器--多因子技术!高分文章都用它!
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液相悬浮芯片技术产品

多因子技术可同时检测多个样本的多个指标,如通路中多个相关蛋白的共检测。
虽然液相蛋白定量检测的技术很多,但是大多数的技术仅能对样本进行单一指标的检测,同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测,操作繁琐,且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户,传统的技术无法满足需要。日常实验中,常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测,如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析,由于这些因子的含量较少,低于一般常规方法的检测下限,使用常规的蛋白检测方法如Western Blot等很难检测。
而多因子技术样本需求量少(25~60μL/孔),检测指标多,可兼容血清/血浆,细胞上清,细胞/组织裂解液,脑脊液等多种生物学体液。其灵敏度高(部分panel可达到亚fg/ml),宽线性范围(达到6个log),具有高重复性(板内CV< 6-8%,板间< 10%,批间< 15% ),适宜多类型指标的同时测定(炎症,趋化,代谢……)。



多因子技术都有哪些平台


MSD平台

电化学发光Electrochemiluminescence(ECL):一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,是电化学和化学发光两个过程的完美结合。MSD电化学发光检测技术使用SULFO-TAGTM标记物,在MULTI-α RRAY和MULTI-SPORT微孔板的电极表面通电后,电化学作用激发SULFO-TAGTM标记物发出强光。
中检院《CAR-T 细胞治疗产品质量控制检测研究及非临床研究考虑要点》中提到,使用电化学发光Electrochemiluminescence(ECL)和液相悬浮芯片技术检测 CAR-T细胞治疗后样本中细胞因子表达来评估药物的安全性和有效性。
1)灵敏度高
MSD灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6log(从亚皮克级到几万皮克),能同时兼顾高低丰度蛋白的检测。传统ELISA常规线性范围在10pg/ml-1000pg/ml,采用Ultra-sensitivity试剂盒则为0.5-10pg/ml。(对比详情见下图)



2) 节省样本用量可实现多重检测
传统ELISA每孔所需样本量一般为50-100ul。MSD通过点阵技术,在96孔石墨电极板里,可实现每孔25μL样本(若可稀释检测,则用量更低),10个指标的检测,为珍稀样本的研究提供了更多的数据。


3) 样本兼容度高、基质效应小
MSD平台由于其独特的电化学发光原理,可将许多非特异信号予以排除,受样本性质的影响更小(如粘稠样本,悬浊颗粒样本等),因此对于各类生物学样本的兼容度高。 目前测定样本包括但不限于:血清,血浆,培养上清,细胞/组织裂解液,脑脊液,尿液,眼睛房水,灌洗液等生物学样本。
4) 信号稳定且不受显色顺序影响
MSD由于基于电化学发光原理,信号分子SULFO-TAG需在电激发的情况下才能产生信号,因此整个实验流程无需避光,每孔激发与信号采集时长统一,避免了像ELISA底物与终止液加入顺序先后所导致的数据差异,不受操作人员技术水平差异的影响。请见下图电化学发光平台示意图:



5) 实验流程简便、快速、多元化
MSD提供了更为便捷快速的实验流程,通常只需4-5小时,即可完成整个检测流程,简要步骤如下:




Luminex平台

国内又称为“液相悬浮芯片技术”。它有机整和了荧光编码微球技术、激光分析技术、流式细胞技术、高速数字信号处理技术、计算机运算法则等多项最新科技成果,具有自由组合、高通量、高速度、低成本、准确性高、重复性好、灵敏度高、线性范围广、无需洗涤、操作简便、在同一平台上即可完成蛋白质和核酸的检测等优点,代表着生命科学基础研究和医学诊断技术的发展方向。被国际业界专家评价为临床诊断的趋势性技术之一。其技术原理为用不同配比的两种红色分类荧光染料将直径为 5.6 微米的聚苯乙烯微球染成不同的荧光色,从而获得多达 100 种荧光编码的微球。把针对不同待测物的抗体分子或者基因探针以共价交联的方式结合到特定的编码微球上,每个编码微球都对应相应的检测项目。先把针对不同待测物的荧光编码微球混合,然后加入待测物质或者待测的扩增片段,所形成的复合物再与标记荧光素发生结合反应。微球在流动鞘液的带动下单列依次通过红绿激光,红激光用来判定微球的荧光编码,绿激光用来测定微球上报告分子的荧光强度。从而达到快速准确的定量检测目的。
特点
1、既能检测蛋白,又能检测核酸
2、既能广泛用于临床,又能用于多学科科研领域
3、真正意义的“高通量”检测,一次检测100个指标
4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平


基本原理

应用微球和流式细胞仪的原理,微球内部含有三种免疫荧光,通过荧光不同的比例可以区分100种不同的微球。每种微球可以用 来检测一种不同的蛋白或基因。因此,利用微球技术,可以同时检测高达100个蛋白或基因。
Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对 不同目标分子的特异性抗体,不同的微球在一定程度上可以自由组合,这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多 目标分子的同时测定可以大大减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间,并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。


实验流程


适用范围


结果展示


CBA平台

Cytometric Bead Array(CBA),细胞因子微球检测技术。即微量样本多指标流式蛋白定量技术是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法,它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。是一种基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法,它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。BD公司利用流式细胞仪可对荧光信号进行级数放大的特性,将受检的可溶性因子附着于一些具有近似细胞直径的微粒上,即可对受检样品中的各种可溶性因子进行检测。 CBA的基本原理近似于ELISA的检测,即利用微小、分散的颗粒捕获液体待测物,并利用流式细胞仪检测类似“三明治”的颗粒一一待测物复合体所散发的荧光,从而测定待测物的数量。


基本原理

通过利用一系列带有荧光标记的微小、分散的微球连接特定的捕获抗体以捕捉溶液系统中的待测物,通过对应各种不同检测物的特异微球上所带有荧光强度不同从而同时测定分析样本中多种可溶性成分的数量。


强大优势

1、能够同时对单个样本进行多种检测。
2、较传统检测节省样本量9倍。
3、灵敏度高、重复性好。
4、所有分析只需一组标准曲线。
5、避免酶联反应所致人工假象。
6、节省操作时间。
7、节省检测时间。
CBA技术与传统的蛋白定量相比有下列优点:


适用范围

◇ 检测样本
血清、血浆、眼泪、唾液、体腔灌洗液、细胞培养液上清、细胞裂解物等等各种液相样本中可溶性细胞因子、炎症因子、趋化因子、酶等的浓度检测
◇ 应用领域
肿瘤研究及肿瘤疾病的辅助诊断、疗效和预后监测
干细胞研究和干细胞治疗监测
免疫学研究和免疫疾病的辅助诊断和监控
感染疾病的研究及辅助诊断和疗效评价
免疫功能监测
药效评价,药物研发、疫苗研究
细胞信号传导中磷酸化蛋白、凋亡相关蛋白定量分析


LabEx,服务加速实验!!!

实验室报计划主流蛋白检测设备——MSD


液相悬浮芯片产品爆款限时促销

品名 货号 指标
小鼠经典炎症十因子组合 LX-MultiDTM-10 IL-10,IL-12p70 ,CXCL1/ GRO/ alpha/KC /CINC-1,IFN-gamma,TNF-alpha,IL-1,beta /IL-1F2 , IL-2 ,IL-4 ,IL-5,IL-6
人经典炎症因子组合 LX-MultiDTH-10 IL-8/CXCL8,IL-10,IL-12 p70,IL-13,TNF-alpha,IFN-gamma,IL-1 beta/IL-1F2,IL-2,IL-4,IL-6
大鼠经典炎症因子组合 LX-MultiDTR-10 IL-10,IL-12p70 ,CXCL1 /GRO/ alpha/ KC/ CINC-1,IFN-gamma,TNF-alpha,IL-1,beta /IL-1F2 , IL-2 ,IL-4 ,IL-5,IL-6
人细胞因子探索组合-45因子 LX- MultiDTX-45 CCL2/JE/MCP-1,CCL3/MIP-1 alpha,CCL4 /MIP-1 beta,CCL5/RANTES,CCL11/Eotaxin,CCL19/MIP-3 beta,CCL20/MIP-3 alpha,CD40 Ligand/TNFSF5,CX3CL1/Fractalkine,CXCL1/GRO alpha/KC/CINC-1,CXCL2/GRO beta/MIP-2/CINC-3,CXCL10 /IP-10/ CRG-2,EGF,FGF basic/FGF2/bFGF,Flt-3 Ligand /FLT3L,G-CSF,GM-CSF,Granzyme B,IFN-alpha 2/IFNA2,IFN-beta,IFN-gamma,IL-1 alpha/IL-1F1,IL-1 beta/IL-1F2,IL-1ra/IL-1F3,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8/CXCL8,IL-10,IL-12 p70,IL-13,IL-15,IL-17/IL-17A,IL-17E/IL-25,IL-33,PD-L1/B7-H1,PDGF-AA,PDGF-AB/BB,TGF-alpha,TNF-alpha,TRAIL/TNFSF10,VEGF
人细胞因子探索组合-48因子 LX- MultiDTX-48 FGF basic,Eotaxin,G-CSF,GM-CSF,IFN-γ,IL-1β,IL-1ra,IL-1α,IL-2Rα,IL-3,IL-12 (p40),IL-16 ,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8,IL-9,GRO-α,HGF,IFN-α2,LIF,MCP-3,IL-10,IL-12 (p70),IL-13,IL-15,IL-17A,IP-10,MCP-1 (MCAF),MIG,β-NGF,SCF,SCGF-β,SDF-1α,MIP-1α,MIP-1β,PDGF-BB,RANTES,TNF-α,VEGF,CTACK,MIF,TRAIL,IL-18,M-CSF,TNF-β

 


电化学发光技术产品

中检院《CAR-T 细胞治疗产品质量控制检测研究及非临床研究考虑要点》中提到,使用电化学发光Electrochemiluminescence(ECL)和液相悬浮芯片技术检测 CAR-T细胞治疗后样本中细胞因子表达来评估药物的安全性和有效性。
实验室报计划主流蛋白检测设备——MSD

指标 种属 货号
Osteocalcin, Osteonectin, Osteopontin Human LX-K15147C-1
C-Peptide,GIP (total),GLP-1 (total),Glucagon,Insulin,Leptin,PYY (total) Human LX-K15274K-1
BDNF, FGF-21, Ghrelin (total), Glucagon, Leptin Human LX-K15277K-1
GLP-1 (active), Glucagon, Insulin Human LX-K15277K-1
Leptin, Insulin Human LX-K15164C-1
BAFF, BDNF, β-NGF, C-Peptide, FGF-21, FGF-23, FSH, Ghrelin (active), Ghrelin (total), GIP (active), GIP (inactive), GIP (total), GLP-1 (active), GLP-1 (inactive), GLP-1 (total), Glucagon, Insulin, Leptin, Luteinizing Hormone (LH), PP, Proinsulin, PYY (total) Human LX-K15281K
Insulin, Leptin Mouse K15124C-1
Insulin, Leptin Rat K15158C-1
GLP-1 (total), Glucagon, Insulin Mouse,Rat K15159C-1

 


液相悬浮芯片技术产品

指标 种属 货号
Amylin (active) ,Amylin (total) ,C Peptide Ghrelin (active) , GIP(total) , GLP-1 (active) ,GLP-1(total),Glucagon ,IL-6,Insulin,Leptin,MCP-1/CCL2,Pancreatic,Polypeptide (PP),PYY (total),TNF , Human LX-HMHEMAG-34K
Adiponectin,Adipsin/Factor D,NGAL/Lipocalin-2,PAI-1 (total),Resistin, Human LX-HADK1MAG-61K
Adiponectin,HGF,IL-1 ,IL-6,IL-8/CXCL8,Leptin,MCP-1 /CCL2,NGF,PAI-1 (total),Resistin,TNF Human LX-HADCYMAG-61K
Cathepsin S,Chemerin,DPPIV/CD26,EN-RAGE /S100A12,Endocan/ESM-1,Fetuin A/AHSG,FGF basic /FGF2 /bFGF,FGF-23,Galectin-3,ICAM-1 /CD54,IGFBP-6,Insulin,Leptin/OB,LIF,Lipocalin-2/NGAL,Prolactin,Protein S/PROS1,RAGE/AGER,Serpin A12,Serpin E1/PAI-1,TIMP-1 Human LX-LXSAHM-30
HMW Adiponectin/Acrp30,Angiopoietin-like Protein 4/ANGPTL 4,BMP-4,CCL2/JE/MCP-1,CCL5/RANTES,FGF acidic/FGF1,HGF,IGFBP-1,IGFBP-2,IGFBP-3,IGFBP- rp1/IGFBP-7,IL-1 beta/IL-1F2,IL-6,IL-8/CXCL8,IL-10,M-CSF,MIF,Myeloperoxidase/MPO,Oncostatin M/OSM,PBEF/Visfatin,Pentraxin 3/TSG-14,RBP4/ Retinol-Binding Protein 4,Resistin,TNF-alpha Human LX-LXSAHM-24
C-peptide,Ghrelin,GIP,GLP-1,Glucagon,Insulin,Leptin,PAI-1 (total),Resistin,Visfatin, Human LX-171A7001M
FSH,GH,LH,Prolactin,TSH Human LX-171AHR1CK
IGFBP-1,IGFBP-2,IGFBP-3,IGFBP-4,IGFBP-5,IGFBP-6,IGFBP-7 Human LX-171AGR1CK
Amylin (active) ,C-Peptide 2,Ghrelin (active) ,GIP (total),GLP-1 (active) ,GLP-1 (total) ,Glucagon ,IL-6,Insulin,Leptin,MCP-1/CCL2,Pancreatic,Polypeptide (PP),PYY (total),Resistin,Secretin,TNF Mouse LX-MMHE-44K
Adiponectin/Acrp30,Angiopoietin-2,BAFF/BLyS/TNFSF13B,C-Reactive Protein/CRP,CCL2/JE/MCP-1,CCL5/RANTES,Complement Factor D/Adipsin,DPPIV/CD26,FGF basic/FGF2/bFGF,FGF-21,ICAM-1/CD54,IGFBP-1,IL-1 beta/IL-1F2,IL-6,IL-10,M-CSF,Oncostatin M/OSM,Prolactin,Proprotein Convertase 9/PCSK9,RAGE/AGER,Resistin,Serpin E1/PAI-1,TNF-alpha Mouse LX-LXSAMSM-23
HGF,IGFBP-3,Leptin/OB,TIMP-1,VEGF Mouse LX-LXSAMSM-05
Amylin (active) ,C-Peptide 2,Ghrelin (active)  , GIP(total), GLP-1 (active) ,Glucagon ,IL-6,Insulin,Leptin,MCP-1/CCL2,Pancreatic,Polypeptide (PP),PYY (total),TNF Rat LX-RMHMAG-84K
ICAM-1/CD54,IL-1beta/IL-1F2,IL-6,IL-10,TIMP-1,TNF-alpha, Rat LX-LXSARM-07
VEGF    
Ghrelin,GLP-1,Glucagon,Leptin,PAI-1 Rat LX-171L7001M

 

 

详见LabEx网站( http://www.u-labex.com)或来电咨询!
基因水平:PCR Array
蛋白水平:MSD、Luminex、CBA、Antibody Array、ELISA
细胞水平:磁珠分选、流式细胞分析
组织水平:多重免疫组化、病理分析

联系电话:4008-168-068 转3
联系邮箱:labex@univ-bio.com
公众平台:多因子实验服务专家
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