LabEx 流式服务实例分享——如何同时检测小鼠肺组织的10个指标
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本周分享的是LabEx采用BD Celesta(3激光12色)正常小鼠的肺组织进行B细胞、NK细胞、DC细胞和巨噬细胞的分析。

    

整个panel全部为表面marker(CD206要破膜哦!),抗体使用量按照厂商推荐。

    

样本类型:C57小鼠(肺组织)

仪器:BD Celesta

实验Panel:

   

     

实验设置:

   

类型

管数

作用

Blank

1

调节电压,确认阴性细胞群位置

单阳管

10

调节补偿

样本管

1

正式样本管

   

实验步骤:

1、小鼠肺组织按照说明书要求GentleMACs解离成单细胞悬液,过70um滤网,预冷1*PBS清洗(若有红细胞,可再进行裂红处理)。

2、细胞染色:按照Live/Dead、FcR阻断剂、表面的顺序进行染色。

   

实验结果

   

实验试剂

   

货号 名称 品牌
564406 Fixable Viability Stain 510 BD Pharmingen
560510 Ms CD45 Alexa 700 30-F11 BD Pharmingen
553089 Ms CD45R/B220 PE RA3-6B2 BD Pharmingen
560618 Ms NK-1.1 APC-Cy7 PK136 BD Pharmingen
557396 CD11b FITC M1/70 BD Pharmingen
565411 Ms F4/80 BV421 T45-2342 BD Pharmingen
558079 Ms CD11c PE-Cy7 HL3 BD Pharmingen
563413 Ms I-A I-E BV605 M5/114.15.2 BD Pharmingen
564200 Ms CD86 BV650 GL1 BD Pharmingen
565250 Ms CD206 Alexa 647 MR5D3 BD Pharmingen
554656 Stain Buffer FBS BD Pharmingen
553141 Ms CD16/CD32 Pure 2.4G2 BD Pharmingen
562574 Transcription Factor Buffer Set BD Pharmingen
130-095-927 Lung Dissociation Kit, mouse Miltenyi Biotec
130-093-237 gentleMACS 25 C Tubes Miltenyi Biotec
17544602-1 Ficoll-Paque PREMIUM 1,084 Cytiva
abs9474 组织保存液 Absin
abs9101 1*红细胞裂解液 Absin
abs7008 70um细胞过滤器 Absin
abs9484 RPMI-1640培养基 Absin
abs972 胎牛血清(优级) Absin
abs962 1*PBS Absin

   

LabEx,让服务加速实验!!!

   

详见LabEx网站( www.u-labex.com)或来电咨询!
基因水平:PCR Array、RT-PCR、PCR、单细胞测序
蛋白水平:MSD、Luminex、CBA、Elispot、Antibody Array、ELISA、Sengenics
细胞水平:细胞染色、细胞分选、细胞培养、细胞功能
组织水平:空间多组学、多重荧光免疫组化、免疫组化、免疫荧光
数据分析:流式数据分析、组化数据分析、多因子数据分析
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