LabEx 流式服务实例分享——小鼠肿瘤的10色分析
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本周分享的是LabEx采用BD Celesta(3激光12色)小鼠肿瘤进行T细胞、NK细胞及调节性T细胞(Tregs)10色分析实例。的分析。

    

整个panel全部为包括表面marker和核内转录因子,抗体使用量按照厂商推荐。

    

样本类型:小鼠肿瘤

仪器:BD Celesta

实验Panel:

   

     

实验设置:

   

类型

管数

作用

Blank

1

调节电压,确认阴性细胞群位置

单阳管

10

调节补偿

样本管

1

正式样本管

   

实验步骤:

1、小鼠肿瘤按照说明书要求GentleMACs解离成单细胞悬液,过70um滤网,预冷1*PBS清洗(若有红细胞,可再进行裂红处理)。

2、细胞染色:按照Live/Dead、FcR阻断剂、表面的顺序进行染色。

   

实验结果

   

实验试剂

   

货号 名称 品牌
564406 Fixable Viability Stain 510 BD Pharmingen
561037 Ms CD45 APC-Cy7 30-F11 BD Pharmingen
557984 Ms CD3e Alexa 700 500A2 BD Pharmingen
561836 Ms CD4 PE-Cy5 RM4-5 BD Pharmingen
561109 Ms CD8a PerCP-Cy5.5 53-6.7 BD Pharmingen
566228 Ms CD25 BV421 3C7 25ug BD Pharmingen
561067 Ms CD49B Pan-NK Cells FITC DX5 BD Pharmingen
560402 Ms Foxp3 Alexa 647 MF23 BD Pharmingen
563894 Ms CD45R/B220 BV786 RA3-6B2 BD Pharmingen
563015 CD11b BV605 M1/70 BD Pharmingen
554656 Stain Buffer FBS 500mL BD Pharmingen
564219 Hu Fc Block Pure  Fc1.3216 50ug BD Pharmingen
130-096-730 Tumor Dissociation Kitmouse Miltenyi Biotec
130-093-237 gentleMACS 25 C Tubes Miltenyi Biotec
abs9101 1*红细胞裂解液 Absin
abs7008 70um细胞过滤器 Absin
abs9484 RPMI-1640培养基 Absin
abs972 胎牛血清(优级) Absin
abs962 1*PBS Absin

   

LabEx,让服务加速实验!!!

   

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基因水平:PCR Array、RT-PCR、PCR、单细胞测序
蛋白水平:MSD、Luminex、CBA、Elispot、Antibody Array、ELISA、Sengenics
细胞水平:细胞染色、细胞分选、细胞培养、细胞功能
组织水平:空间多组学、多重荧光免疫组化、免疫组化、免疫荧光
数据分析:流式数据分析、组化数据分析、多因子数据分析
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