PCR技术又称为聚合酶链式反应,是一种体外扩增特定DNA片段的分子生物学技术,被广泛应用于基础研究、疾病诊断、农业检测和法医调查等领域。
PCR技术原理
PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成:
①变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,双链DNA解旋成为单链;
②退火:温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
③延伸:DNA模板-引物结合物在72℃、DNA聚合酶的作用下,沿着模板链将引物3’端进行延伸。重复循环变性-退火-延伸三过程(25-35次)模板DNA的含量可扩大100万倍以上。