人CAR-T细胞9色Panel-乐备实(LabEx)官网

产品介绍

检测指标: 轻触检测指标名称可查看该指标具体功能介绍

L/DCD8CCR7CD3CD4CD45RACD45CD28CD69

参考文献

CD73-Mediated Immunosuppression Is Linked to a Specific Fibroblast Population That Paves the Way for New Therapy in Breast Cancer

Ilaria Magagna, Nicolas Gourdin, Yann Kieffer, Monika Licaj, Rana Mhaidly, Pascale Andre, Ariane Morel, Anne Vincent-Salomon, Carine Paturel, Fatima Mechta-Grigoriou

Cancers (Basel) (IF:0) 2021 Nov 23;13(23):5878. doi: 10.3390/cancers13235878.
The miR-200c/141-ZEB2-TGFβ axis is aberrant in human T-cell prolymphocytic leukemia

Stefan J Erkeland, Christiaan J Stavast, Joyce Schilperoord-Vermeulen, Giada Dal Collo, Harmen J G Van de Werken, Leticia G Leon, Antoinette Van Hoven-Beijen, Iris Van Zuijen, Yvonne M Mueller, Eric M Bindels, Dick De Ridder, Mies C Kappers-Klunne, Kirsten Van Lom, Vincent H J Van der Velden, Anton W Langerak

Haematologica (IF:7.9) 2022 Jan 1;107(1):143-153. doi: 10.3324/haematol.2020.263756.
Targeting brain lesions of non-small cell lung cancer by enhancing CCL2-mediated CAR-T cell migration

Hongxia Li, Emily B Harrison, Huizhong Li, Koichi Hirabayashi, Jing Chen, Qi-Xiang Li, Jared Gunn, Jared Weiss, Barbara Savoldo, Joel S Parker, Chad V Pecot, Gianpietro Dotti, Hongwei Du

Nat Commun (IF:15.7) 2022 Apr 20;13(1):2154. doi: 10.1038/s41467-022-29647-0.

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技术平台介绍

流式细胞术实验原理

流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）利用流式细胞仪对处在快速、直线、流动状态中的单细胞或生物颗粒进行多参数、快速定量分析，同时对特定群体加以分选的现代细胞分析技术。其特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射和光吸收来定量测定细胞 DNA 含量、细胞体积、蛋白质含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原等许多重要参数。根据这些参数将不同性质的细胞分开，以获得供生物学和医学研究用的纯细胞群体。目前最高分选速度已达到每秒钟 3 万个细胞。

样本处理：

在应用流式细胞术中，制备出合格的分散单细胞是流式细胞术样本制备技术中重要的一环。它既要求组织分散成为单个细胞，又要维持细胞的固有生物化学成分及生物学特性。

染色方案：

案例分享：

LabEx 流式服务实例分享—小鼠脾脏TH1/2/17/Treg免疫细胞的9色分析

LabEx用BD Celesta（3激光12色）对正常小鼠脾脏进行T细胞及相关亚群，调节性T细胞（Tregs）9色分析实例。整个panel为包括表面marker、胞内因子和核内转录因子，抗体使用量按照厂商推荐。

实验Panel：

实验结果：

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服务周期

服务周期需要根据试剂盒货期而定，具体请咨询LabEx

样品要求

在样本收集、储存和分析过程中，应注意无菌操作，以防止污染导致分析结果的误差。具体不同的样本有对应的样本处理步骤，详细请咨询LabEx

常见问题

1、该货号检测指标有哪些？

该货号为固定panel，可检测的指标如下：L/D,CD8,CCR7,CD3,CD4,CD45RA,CD45,CD28,CD69

2、如何提取外周血里的PBMC？

人外周血PBMC的制备流程是：
1. 收集抗凝人外周血，用1640培养基或PBS按照1:1的比例稀释，上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。
2. 在15 mL离心管中，先加入3 mL 充分混匀的Ficoll液（1.077密度），再沿着管壁小心加入2 mL稀释后的血液，血液和Ficoll液分层明显为成功。
3. 将样本小心转移到离心机，500 g离心25 min。
4. 小心取出离心管，弃掉上层黄色的液体，吸取中间层的白色薄膜层，即为单个核细胞。
5. 用10 mL PBS洗涤获得的单个核细胞，250 g离心10 min，弃上清。
6. 重复洗涤一次并重悬细胞备用。

3、流式实验适用的样本类型有哪些？

流式实验适用于单一细胞悬浮样本，如细胞悬液、血液、骨髓、脾脏等组织。此外，流式实验还可以用于确定群体细胞中不同亚型的比例，例如淋巴细胞的CD4+和CD8+亚型以及血小板的活化状态等。