首页  > 

邻近连接分析（Proximity Ligation Assay, PLA）：一种基于抗体特异性识别靶蛋白、通过抗体偶联寡核苷酸链引导连接反应实现信号放大的蛋白互作检测技术。其核心原理是当两个靶蛋白发生相互作用且距离足够近时，抗体偶联的寡核苷酸可通过连接酶形成可扩增的 DNA 片段，最终通过荧光标记探针杂交产生离散点状荧光信号（每个亮点代表一对相互作用的蛋白分子）。

可视化蛋白互作(PLA)实验流程

抗体-A+抗体-B结合目标蛋白 → DNA探针靠近 → 连接 → 扩增 → 信号检测
1） 封闭样本
2） 一抗孵育： 两种一抗分别与位于一种蛋白质或两种邻近蛋白质上的目标表位结合
3） Navenibody孵育： Navenibodies（与专有寡核苷酸臂结合的精选抗体）与各自的一抗结合
4） DNA circle形成： 当 Navenibodies 靠近时 ， 附着的寡聚物能形成 DNA circle ，通过减少非特异性背景染色来保证高特异性5） 扩增和检测 ：加入聚合酶后 ， 就会启动    滚环循环扩增过程。 标记的探针与扩增的      DNA结合 ， 显色形成亮点