一、研究背景与科学问题

肿瘤微环境（TME）中细胞因子网络的调控机制日益成为肿瘤治疗研究的关键。癌相关成纤维细胞（CAFs）作为TME中最主要的基质细胞类型之一，具有高度功能异质性，其在化疗耐药形成中的作用尚不明确。识别与化学耐药相关的CAF亚群并阐明其活化机制，对发展靶向基质细胞的精准抗癌策略具有重要意义。

二、抗体芯片技术在细胞因子筛选中的应用

问：抗体芯片为什么被称为“高通量Western Blot”？

    
答：抗体芯片能够在一次实验中同时检测数百种蛋白的表达水平，其原理与Western Blot（WB）类似，均基于抗体-抗原特异性结合。但与传统WB每次只能检测一种蛋白相比，抗体芯片通量显著提高，可在保持高特异性和灵敏度的前提下，实现大规模蛋白质表达谱分析，故得名“高通量WB”。

问：抗体芯片有哪些优势？

    
答：主要包括：

高通量性：可同步检测多个指标，节省样本和时间；

高灵敏度：可检测低至pg/mL级别的蛋白；

样本需求少：通常仅需100–200 µL样品；

操作相对简便：无需复杂电泳与转膜步骤；

兼容多种样本：如血清、血浆、细胞上清、组织裂解液等。

本研究使用人肿瘤微环境抗体芯片（AAH-CYT-5，涵盖80个细胞因子），对化疗敏感与耐药乳腺癌组织的条件培养基进行筛选，成功鉴定出CCL18、IL-6和IL-8为潜在关键因子。

三、关键发现与机制验证

研究人员发现，在化疗耐药患者的肿瘤样本中，CD10⁺GPR77⁺CAF亚群显著增多。通过抗体芯片筛选及后续实验验证，发现：

CCL18在耐药组中高表达，并可诱导正常成纤维细胞高表达CD10和GPR77；

CCL18主要来源于肿瘤相关巨噬细胞（TAMs），其密度与CAF丰度及化疗耐药呈正相关；

体外功能实验显示，重组CCL18处理可增强成纤维细胞的活化及胶原收缩能力；

动物实验中，CCL18通过激活成纤维细胞显著促进肿瘤发生和化疗耐药。

四、抗体芯片的应用领域

问：抗体芯片可用于哪些研究领域？

    
答：抗体芯片技术广泛应用于：

生物标志物发现：如疾病早期诊断、预后评估及疗效预测标志物筛选；

信号通路研究：剖析细胞因子、趋化因子网络及关键调控机制；

药物开发与药效评价：分析药物处理前后蛋白表达谱变化；

免疫微环境解析：肿瘤、自身免疫病、感染性疾病中的免疫状态评估；

多组学整合研究：与转录组、代谢组数据联合揭示表型调控机制。

五、技术服务与平台选择

问：抗体芯片哪家公司可以做？乐备实抗体芯片业务有何特点？

  
答：目前多家生物科技公司提供抗体芯片服务。以乐备实为例，其抗体芯片业务涵盖人、小鼠、大鼠等多个物种，具备以下特点：

产品线全面：提供包括炎症、血管生成、肿瘤微环境等多种功能分类芯片；

技术平台成熟：基于Luminex xMAP®、固相芯片等多种技术路线，兼顾通量与灵活性；

专业数据分析：提供标准化生物信息学分析，助力数据解读与挖掘；

定制化服务：支持根据研究需求定制多指标联合检测 panel。

六、研究结论与展望

本研究通过抗体芯片技术高效筛选出CCL18作为关键细胞因子，并揭示TAMs通过CCL18激活CD10⁺GPR77⁺CAF，进而诱导乳腺癌化疗耐药的作用机制。该发现为靶向特定CAF亚群逆转化疗耐药提供了潜在靶点，也突显了抗体芯片在肿瘤微环境研究中的重要应用价值。

未来研究可进一步结合空间多组学与单细胞技术，在提升维度的基础上解析CCL18信号的空间分布特征及细胞互作网络，为临床干预提供更精确的理论依据。

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