ELISpot，全称为酶联免疫斑点技术，是一种用于检测和量化细胞分泌特定蛋白功能的高灵敏度技术。其核心原理可以概括为 “在细胞分泌部位就地捕获并显色，形成一个可视化的斑点”。 

实验流程图示：

ELISpot的突出优势：

超高灵敏度： 百万分之一阳性细胞检测率，灵敏度比传统Elisa方法高2-3个数量级。

单细胞水平： 在单细胞水平对抗体分泌细胞（ASC）及细胞因子（CK）分泌细胞进行功能分析，结果更直观、准确。

操作相对简便，节约样品： 与更复杂的流式细胞术细胞内染色相比，ELISot操作更简单，且只需要少量细胞，例如，45毫升的血液就足以用于测试600种不同抗原/肽类物质的反应。

动态细胞功能检测：检测到的细胞因子不是已存在的，而是在检测过程中，被加入的刺激物刺激而分泌出来的。

直观、可信度高：一个阳性细胞一个斑点，斑点数量代表分泌细胞因子的细胞数量多少，斑点大小代表该细胞分泌细胞因子水平的多少。

Elispot在哪里大显身手？

疫苗研发与评价： 评估疫苗诱导的T细胞免疫水平，是判断疫苗有效性的黄金标准之一。

肿瘤免疫治疗： 监测癌症患者接受免疫检查点抑制剂（如PD-1/PD-L1抑制剂）或CAR-T细胞治疗后，特异性T细胞是否被成功激活。

感染性疾病研究： 研究结核病、HIV、新冠病毒等病原体特异的T细胞免疫应答。

自身免疫病与过敏研究： 分析异常活化的免疫细胞及其靶点。

基础免疫学研究： 探索T细胞、B细胞等免疫细胞的功能机制。

可检测物种，可检测因子非常丰富： 

人：TNF-α、Perforin、IL-1α、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12/-23 p40、IL-12 p70、IL-13、IL-17A、IL-21、IL-23、IL-27、IL-31、IFN-γ、IFN-α、Granzyme B、GM-CSF、EBI3、IP-10

非人类灵长类动物：TNF-α、Perforin、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12/-23 p40、IL-12 p70、IL-13、IL-17A、IL-21、IL-23、IFN-γ、IFN-α、Granzyme B、IP-10、GM-CSF

小鼠：TNF-α、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12/-23 p40、IL-12 p70、IL-17A、IL-22、IFN-γ

大鼠：IL-22、IFN-γ

奶牛：TNF-α、IL-4、IL-8、IL-17A、IFN-γ

猪：TNF-α、IL-2、IL-5、IL-17A、IFN-γ

绵羊：IL-4、IL-5、IL-17A、IFN-γ

狗：IL-8、IFN-γ

马：IL-10、IFN-γ

山羊：IL‑17A

IFN‑γ：雪貂、兔子、鸡、棉鼠、仓鼠、猫、猎豹、美洲豹、狮子、犀牛、土拨鼠、鲑鱼

现货：人/小鼠 IL-2、IFN-γ

可接样本：冻存细胞（需复苏）、新鲜全血、新鲜提取的PBMC

实验服务结果：读板图片（电子版）、Elispot读板数据（电子表格文件）以及《实验结果报告》。

乐备实是国内专注于提供高质量蛋白检测以及组学分析服务的实验服务专家，自2018年成立以来，乐备实不断寻求突破，公司的服务技术平台已扩展到单细胞测序、空间多组学、流式检测、超敏电化学发光、Luminex多因子检测、抗体芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫组化、DSP空间多组学等30多个，建立起了一套涵盖基因、蛋白、细胞以及组织水平实验的完整检测体系。

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