目的：评估改良附子煎剂（MFZD）对骨关节炎（OA），尤其是 OA 相关炎症的药效学作用和治疗机制。

研究方法：采用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）鉴定改良夫子煎中的主要成分。通过在 Sprague-Dawley 大鼠关节内注射单碘乙酸盐 (MIA)，建立了 OA 模型，以评估 MFZD 通过灌胃的抗 OA 疗效。体内研究包括疼痛行为评估、组织病理学观察、免疫组化分析、酶联免疫吸附试验（ELISA）、中观尺度发现（MSD）和Western印迹（WB），以证明MFZD对OA的抗炎和抗变性功效。通过网络药理学分析和京都基因组百科全书（KEGG）通路富集，分别确定了MFZD的潜在靶点和通路。随后，通过WB对肿瘤坏死因子（TNF）信号传导及相关靶点进行了体外验证。为了进行体外验证，从大鼠体内分离出原发性滑膜成纤维细胞，在 TNF-α 存在下用含 MFZD 的血清（MFCS）处理。

结果显示：UPLC-MS/MS分析确定了MFZD中的主要化合物，包括反式肉桂醛、苍术内酯I、芍药苷、茯苓酸、卡米卡林、talatisamine、fuziline、苯甲酰基hypacoinine、苯甲酰基mesaconine、苯甲酰基aconine、次aconitine、脱氧aconitine、mesaconitine和aconitine。MFZD治疗改善了爪退缩阈值（PWT），减轻了组织病理学损伤，降低了血清中的TNF-α和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1），并纠正了软骨的异常合成代谢/代谢。通过网络药理学分析，TNF 信号被确定为 MFZD 的抗炎机制，WB 结果也验证了这一点，即 MFCS 治疗可减少 TNF-α 诱导的 p-MKK3/MKK6、p-p38、TRAF2、p-p65 和 VCAM1 蛋白表达。

结论：该研究首次揭示了MFZD与TNF-α/TRAF2/NF-κB信号相关的抗炎机制，为MFZD在OA治疗中的潜力提供了机制上的启示。