肝细胞癌是全球主要的肿瘤致死性疾病，临床治疗手段有限。免疫检查点阻断疗法虽为肝癌治疗带来突破，但仅10%–30%患者可有效应答，多数患者会出现获得性耐药，疗效受限。肿瘤相关巨噬细胞是肝癌免疫微环境的核心组分，占肿瘤浸润免疫细胞的50%左右，其异质性及调控肿瘤进展、介导免疫耐药的机制尚不明确。

目前肿瘤相关巨噬细胞研究多局限于传统M1/M2二元分类，难以阐释其复杂的肿瘤调控机制。CD48是一种GPI锚定细胞膜蛋白，现有研究多聚焦其在T细胞、NK细胞中的作用，其在巨噬细胞及肝癌中的功能、信号调控机制尚未明确，是当前肝癌免疫治疗领域亟待解决的难题。

2025年12月21日，第四军医大学李萌团队在顶尖期刊《Gut》发表相关研究，围绕肝癌肿瘤相关巨噬细胞的新型免疫调控靶点展开深度探索。

该研究通过临床样本多组学分析，鉴定出CD48阳性肿瘤相关巨噬细胞这一新型促癌亚群。研究证实，CD48可与MMP14形成细胞膜顺式复合物，激活RAP1-YAP-STAT3信号通路，上调免疫抑制基因表达，进而推动肝癌进展与免疫治疗耐药。

研究数据表明，基因敲除或抗体阻断CD48，可重塑巨噬细胞的抗肿瘤表型，增强CD8+T细胞的杀伤能力。同时，靶向CD48与抗PD-1治疗具备显著协同抑癌效果。该研究证实CD48是肿瘤相关巨噬细胞上的全新免疫检查点，为肝癌免疫耐药破解、新型靶向联合治疗方案研发提供了全新靶点与理论支撑。

一、材料与方法  

（一）临床样本与单细胞测序

收集18例初治HCC活检组织，制备单细胞悬液，执行10× Genomics单细胞RNA测序；基于分支指数分层为高/低侵袭组，进行细胞分群、亚群聚类与细胞通讯分析；在TCGA-LIHC队列验证CD48表达与预后的相关性。  

（二）动物模型与体内实验

构建C57BL/6原位HCC小鼠模型；建立CD48全身敲除（Cd48−/−）小鼠；分组给予抗CD48单克隆抗体、抗PD-1抗体及联合治疗，监测肿瘤生长与转移。

（三）细胞与分子生物学实验

（1）巨噬细胞极化诱导；

（2）流式细胞术检测表型；

（3）免疫共沉淀、共聚焦荧光验证CD48与MMP14相互作用；

（4）核质分离与Western blot检测YAP核转位；

（5）qPCR检测免疫抑制/促炎基因表达；

（6）共培养体系评估CD8+T细胞杀伤功能。  

（四）临床相关性验证

多重免疫荧光染色检测HCC组织CD48、F4/80、CD8共定位；分析CD48+TAMs丰度与肿瘤分期、CD8+T细胞浸润及PD-1抑制剂应答的关联。  

二、结果  

（一）单细胞测序鉴定CD48+TAMs为HCC促肿瘤亚群

18例HCC样本单细胞测序识别出6大细胞群，TAMs与肿瘤细胞、T细胞通讯活跃；TAMs分为4个亚群，c3亚群特异富集于高侵袭肿瘤，呈强免疫抑制表型。该亚群CD48显著高表达，并与促肿瘤、免疫抑制基因正相关；TCGA队列显示，CD48+TAMs特征评分高的患者总生存期显著缩短。  

CD48⁺TAMs 驱动 HCC 恶性进展及免疫抑制

（二）CD48+TAMs与PD-1抑制剂耐药密切相关

抗PD-1治疗非应答者肿瘤组织中，巨噬细胞CD48表达显著高于应答者，且CD48+TAMs亚群明显富集，提示该亚群参与介导免疫耐药。  

（三）CD48缺失重编程TAMs并增强CD8+T细胞功能

Cd48−/−小鼠中，巨噬细胞向M1型极化增强、M2型受抑；CD8+T细胞活化与杀伤功能提升，肿瘤生长与转移显著受抑，证实CD48是TAMs免疫抑制表型的关键调控分子。

（四）CD48-MMP14顺式作用激活RAP1-YAP-STAT3信号轴

机制研究显示，CD48不依赖经典CD48-CD244轴，而是与MMP14在细胞膜形成顺式复合物，激活RAP1，促进YAP核转位并与STAT3结合，上调免疫抑制基因表达，驱动TAMs促瘤表型。  

（五）抗CD48单药及联合抗PD-1协同抗肿瘤

原位HCC模型中，抗CD48单药显著抑制肿瘤；与抗PD-1联用呈现强协同效应，进一步降低肿瘤负荷、提升CD8+T细胞浸润与功能，提示联合治疗可克服免疫耐药。  

（六）临床样本验证CD48的预后价值

多重免疫荧光证实，CD48+TAMs数量随HCC分期升高而增加，与CD8+T细胞浸润呈负相关，支持CD48作为HCC预后标志物与治疗靶点的临床价值。  

三、讨论

（一）研究意义

该研究首次证实CD48是肝癌TAMs上的新型免疫检查点，突破传统M1/M2分类局限，明确CD48+TAMs为驱动HCC进展与免疫耐药的关键亚群。

其核心机制为：CD48与MMP14顺式结合→激活RAP1-YAP-STAT3通路→TAMs向免疫抑制表型极化→抑制CD8+T细胞功能→肿瘤进展与耐药。

靶向CD48可重编程TAMs、解除免疫抑制，单药有效且与抗PD-1协同，为解决HCC低应答率提供新路径。该机制不局限于CD48-CD244经典轴，拓展了GPI锚定蛋白的信号转导认知，对其他实体瘤免疫治疗具有借鉴意义。

（二）临床转化价值

① CD48可作为HCC免疫治疗伴随诊断标志物，筛选优势人群；

② 抗CD48抗体可开发为新型免疫治疗药物；

③ CD48阻断+PD-1阻断有望成为HCC一线/二线联合方案，提升长期生存。  

四、结论

（1）CD48+TAMs是HCC中促肿瘤、介导免疫治疗耐药的特异性巨噬细胞亚群。

（2）CD48通过与MMP14顺式相互作用，激活RAP1-YAP-STAT3信号轴，调控TAMs免疫抑制表型。

（3）CD48是TAMs上新型免疫检查点，抗体阻断可重编程肿瘤微环境，与抗PD-1协同抑制肝癌。

（4）靶向CD48为克服HCC免疫耐药、开发联合免疫治疗提供全新靶点与策略。

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