肝脏衰老，竟会助推癌症全身转移？

近日，Nature Aging（IF：19.4）发表了一项研究 成果Extracellular vesicles derived from senescent hepatocytes drive pan-cancer metastasis in aging，刷新了人们对衰老与肿瘤转移的认知。研究不仅揭示了衰老促进癌症转移的全新机制，更为我们理解衰老与肿瘤的关系提供了崭新的视角。研究通过严谨的实验设计与多维度验证，发现衰老的肝脏竟然是驱动全身多种癌症转移的幕后推手，并详细阐述了其中的分子机制。

一、引言

恶性肿瘤转移是癌症患者死亡的首要原因，临床流行病学数据显示，年龄增长与肿瘤恶性程度、远处转移风险及患者死亡率呈显著正相关，老年群体肿瘤转移发生率远高于年轻群体。传统研究多聚焦肿瘤局部微环境、基因突变累积及免疫衰退，忽略机体衰老状态与远端器官的系统性调控作用。细胞衰老伴随特征性分泌表型，其中细胞外囊泡（EVs）作为细胞间远程通讯核心载体，可携带miRNA等活性物质重塑靶细胞功能。肝脏作为机体代谢中枢与衰老信号枢纽，其病理状态可影响肿瘤进展，但衰老肝脏是否通过循环EVs远程驱动泛癌转移仍属未知。 本研究旨在解析衰老促进肿瘤转移的系统性机制，明确衰老肝脏来源EVs的关键作用，鉴定其功能性miRNA载荷与下游信号通路，并探索靶向干预策略，为老年肿瘤精准抗转移治疗提供理论依据与实验基础。  

二、材料与方法  

（一）临床样本与动物模型

收集不同年龄段肿瘤患者临床队列数据，分析年龄与肿瘤转移的相关性；构建年轻（8–10周）与年老（18–22月）C57BL/6小鼠肿瘤移植模型，包括乳腺癌、肺癌、结直肠癌等多种肿瘤类型，评估衰老对肿瘤远处转移的影响。

（二）细胞外囊泡分离与鉴定

超速离心法分离年轻与年老小鼠及人血清EVs，透射电镜观察形态，纳米颗粒跟踪分析粒径分布，Western blot检测CD63、TSG101等标志物。分离小鼠心、肝、脾、肺、肾等器官来源EVs，比较促转移活性差异。

（三）细胞功能实验

将肿瘤细胞与不同年龄来源EVs共培养，采用划痕愈合实验、Transwell侵袭实验检测细胞迁移与侵袭能力；免疫荧光、qRT-PCR及Western blot检测EMT标志物（E-钙粘蛋白、N-钙粘蛋白、波形蛋白）表达。

（四）miRNA筛选与验证

对年轻与年老EVs进行small RNA高通量测序，生物信息学分析筛选差异表达miRNA；双荧光素酶报告基因实验验证miRNA与PTEN、LATS2的靶向结合；在肿瘤细胞中过表达或敲降miR-25、miR-92a、miR-30c、miR-30d，检测转移表型变化。

（五）分子机制研究

Western blot检测PTEN、LATS2及下游PI3K-AKT、Hippo-YAP通路关键蛋白表达；免疫荧光观察YAP核转位；在小鼠体内特异性敲低肝细胞P2RX7，检测循环EVs含量及肿瘤转移情况。  

（六）干预实验

老年肿瘤小鼠随机分组，分别给予达沙替尼+槲皮素（D+Q）、P2RX7特异性抑制剂、miRNA拮抗剂干预，观察肿瘤转移结节数量及EMT水平变化。

（七）统计学分析

数据以均值±标准差表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异具有统计学意义。

三、结果  

（一）衰老显著促进人与小鼠肿瘤转移

临床队列分析显示，高龄患者肿瘤转移发生率显著高于年轻患者；相同肿瘤负荷下，年老小鼠肿瘤远处播散能力更强，内脏转移病灶数量显著增多，证实机体衰老为肿瘤转移提供全身性有利条件。

图1 衰老促进人和小鼠模型中的肿瘤转移

（二）衰老循环EVs诱导肿瘤细胞侵袭表型

年老个体血清EVs处理的肿瘤细胞，迁移与侵袭能力显著强于年轻EVs处理组，表明衰老EVs是赋予肿瘤细胞侵袭特性的关键介质。

图2 衰老的循环EVs在肿瘤细胞中诱导侵袭性特征

（三）衰老EVs驱动EMT进程增强肿瘤转移能力

年老EVs可下调肿瘤细胞上皮标志物、上调间质标志物，激活EMT程序；小鼠尾静脉注射模型中，年老EVs预处理组肺部转移结节数量显著高于对照组。

图3 老年人与老龄小鼠来源的EVs促进EMT并赋予细胞转移特性

（四）关键miRNA簇介导衰老EVs促转移效应

高通量测序与验证鉴定出miR-25、miR-92a、miR-30c、miR-30d为衰老EVs核心促癌miRNA；临床样本证实，上述miRNA在老年患者肿瘤组织中显著高表达，可独立并协同增强肿瘤细胞转移潜能。

图4 血清EVs中与年龄相关的miRNA失调促进肿瘤转移

（五）miRNA通过靶向PTEN/LATS2激活EMT信号轴

双荧光素酶实验证实PTEN与LATS2为4种miRNA共同靶基因；衰老EVs通过抑制PTEN/LATS2，过度激活PI3K-AKT通路并促进YAP入核，全面启动EMT转录程序；恢复PTEN或LATS2表达可逆转促转移表型。

图5 miR-25，miR-92a，miR-30c和miR-30d在老年患者的肿瘤组织中上调并促进肿瘤转移

（六）衰老肝脏是促转移EVs的主要来源

多器官EVs对比显示，衰老肝脏来源EVs促转移活性最强；衰老肝细胞高表达P2RX7，驱动EVs大量生成；特异性敲低肝细胞P2RX7可显著减少致瘤EVs释放并抑制肿瘤转移。

图6 miR-25、miR-92a、miR-30c和miR-30d通过靶向PTEN和LATS2调节EMT活性促进肿瘤转移

 （七）靶向干预有效阻断衰老相关肿瘤转移

D+Q清除衰老肝细胞、P2RX7抑制剂或miRNA拮抗剂均能显著降低老年小鼠肿瘤转移负荷，抑制EMT进程，验证本机制的临床转化潜力。

图7 来自衰老肝脏的EVs促进肿瘤转移

图8 消除衰老的肝细胞或靶向miRNA抑制肿瘤转移

四、讨论

本研究首次系统阐明衰老肝脏—循环EVs—肿瘤EMT的跨器官调控轴，揭示衰老驱动泛癌转移的全新机制。传统观点将衰老促癌归因于肿瘤细胞自主改变，本研究突破局限，证实肝脏作为衰老信号放大器，通过P2RX7依赖性EVs释放，将衰老信号传递至全身肿瘤，协同激活EMT程序。 研究鉴定的miR-25/92a/30c/30d簇通过共靶向PTEN与LATS2，实现对PI3K-AKT与Hippo-YAP双通路的交叉调控，为理解衰老相关肿瘤恶化提供分子基础。P2RX7作为肝脏EVs生成的关键开关，兼具诊断标志物与治疗靶点价值。干预策略方面，清除衰老细胞、抑制P2RX7或拮抗关键miRNA均展现良好抗转移效果，为老年肿瘤精准治疗开辟新方向。 本研究存在一定局限性：临床样本队列需扩大以验证miRNA标志物效能；P2RX7抑制剂的安全性与靶向递送系统需进一步优化；长期干预对机体代谢与免疫的影响有待深入研究。

五、结论

衰老肝细胞通过P2RX7高表达大量释放含miR-25、miR-92a、miR-30c、miR-30d的EVs，经循环系统远程抑制肿瘤细胞PTEN/LATS2，激活EMT程序，驱动泛癌转移。靶向衰老肝脏来源EVs及其关键分子可有效阻断肿瘤转移，为老年肿瘤抗转移治疗提供全新策略与转化方向。  

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