一、三类核心蛋白互作复合物生物学背景与科研应用
（1）VDAC1+IP3R1 内质网 - 线粒体 MAM 钙转运复合物
分子背景：电压依赖性阴离子通道蛋白 1（VDAC1）定位于线粒体外膜，三磷酸肌醇受体 1（IP3R1）富集于内质网膜，二者在线粒体相关内质网膜（MAM）形成稳定蛋白互作接触位点，是胞内钙信号跨细胞器转运的核心分子桥。IP3R1 介导内质网钙库释放 Ca²⁺，VDAC1 承接钙离子转运进入线粒体基质，调控线粒体钙稳态、氧化磷酸化、细胞凋亡与铁死亡进程；该互作模式在人、小鼠物种中高度保守。
科研应用场景：广泛用于细胞代谢、肿瘤细胞凋亡、神经退行性疾病、缺血再灌注损伤机制研究，可定量 MAM 膜接触位点丰度，揭示钙信号紊乱介导的细胞程序性死亡调控通路。
（2）VDAC1-IP3R2 MAM 钙转运功能复合物
分子背景：IP3R2 为 IP3 受体家族亚型，与 IP3R1 组织表达谱存在差异，常与线粒体外膜 VDAC1 结合形成另一套 MAM 钙转运复合物，主要调控上皮细胞、免疫细胞、肝细胞的钙信号传导；同样具备人、小鼠双物种检测适配性。相较于 IP3R1，IP3R2 介导的钙流更偏向调控自噬、炎症活化、脂质代谢平衡，是 MAM 结构稳态维持的关键复合物。
科研应用场景：适配肝脏代谢疾病、巨噬细胞免疫极化、肿瘤脂质代谢、自噬调控方向研究，用于观测病理刺激下内质网 - 线粒体钙转运复合物的组装解离动态变化。
（3）PD-L1-PD-1 肿瘤免疫抑制互作复合物
分子背景：程序性死亡配体 1（PD-L1）表达于肿瘤细胞、抗原提呈细胞表面，程序性死亡受体 1（PD-1）特异性表达于 T 细胞、NK 细胞等效应免疫细胞膜；二者结合后启动胞内抑制信号，阻断免疫细胞增殖、细胞因子分泌与肿瘤杀伤功能，形成肿瘤免疫抑制微环境。该互作仅存在于人源蛋白体系，小鼠同源分子结合亲和力与人源存在显著差异，仅支持人样本检测。
科研应用场景：肿瘤免疫、免疫检查点抑制剂药物筛选、CAR 免疫细胞联合治疗、临床肿瘤组织样本药效评价，原位可视化肿瘤微环境中肿瘤细胞与免疫细胞间的抑制性蛋白互作。
二、PLA 邻位连接技术：蛋白互作原位可视化检测技术
1、核心实验原理
邻位连接技术（Proximity Ligation Assay，PLA）依托一对分别偶联特异性二抗的寡核苷酸探针，靶向结合两个存在相互作用的靶蛋白；当两个蛋白空间距离＜40 nm（存在真实互作）时，两条探针寡核苷酸序列可发生杂交，经 DNA 连接酶形成环状 DNA 模板，再通过滚环扩增（RCA）生成大量重复 DNA 序列，荧光标记探针与扩增产物结合后，荧光显微镜下可观测到单个荧光斑点，1 个荧光斑点即代表 1 组蛋白互作复合物，实现单细胞、组织切片水平原位定性、定量蛋白相互作用。
2、PLA 技术核心优势
（1）原位可视化：区别于 Co-IP、免疫共沉淀只能裂解细胞提取总蛋白检测，PLA 可在完整细胞、石蜡 / 冰冻组织切片中直观展示蛋白互作的亚细胞定位（MAM 膜、细胞膜接触面等）；
（2）超高灵敏度：单分子级检测下限，可捕捉瞬时、弱亲和力蛋白互作，适配 MAM 动态复合物、免疫细胞间短暂配体 - 受体结合等瞬时互作体系；
（3）精准定量：通过荧光斑点计数，可统计学量化组间蛋白互作丰度差异，适配药物干预、基因敲除 / 过表达的对照实验；
（4）多样本兼容：可处理细胞爬片、冰冻组织、临床石蜡切片，支持人、小鼠多物种样本；
（5）特异性优异：双抗体靶向识别双重靶蛋白，规避单分子非特异性染色带来的假阳性干扰。
3、三类靶标适配性
针对 VDAC1-IP3R1、VDAC1-IP3R2 两组 MAM 钙转运复合物，PLA 可直接观测内质网与线粒体膜接触位点的荧光斑点，直观反映 MAM 结构丰度与钙转运复合物组装水平；针对 PD-L1-PD-1，PLA 可在肿瘤组织切片中标记肿瘤细胞与浸润 T 细胞接触面的免疫抑制互作，精准表征肿瘤免疫抑制微环境强度，是常规免疫荧光、Co-IP 无法替代的原位互作验证手段。
三、MAM 钙转运复合物蛋白PLA邻位连接技术服务哪里有？
VDAC1+IP3R1、VDAC1-IP3R2、PD-L1-PD-1 三类蛋白复合物的 PLA 邻位连接原位互作检测，可由乐备实 LabEx（优宁维旗下蛋白检测技术平台）提供全套标准化技术服务。
乐备实具备成熟 PLA 实验平台，配套对应人 / 小鼠物种特异性一抗、PLA 探针试剂盒，可一站式完成样本前处理、封闭孵育、连接扩增、荧光成像、图像定量分析全流程实验：
（1）针对 VDAC1-IP3R1、VDAC1-IP3R2：支持人源细胞、小鼠组织双物种样本 PLA 检测，适配代谢、钙信号、细胞凋亡相关机制课题；
（2）针对 PD-L1-PD-1：人源细胞、临床肿瘤石蜡切片专属 PLA 检测方案，配套免疫检查点药物干预样本批量分析；
（3）配套增值服务：同步提供免疫荧光共定位、Co-IP、Luminex 多因子芯片、抗体芯片等联合验证实验，形成蛋白互作 - 细胞因子分泌多层次完整证据链，广泛服务肿瘤代谢、细胞器互作、肿瘤免疫方向高分机制研究。
| 货号 | 产品名 |
|---|---|
| LX-PLA | PLA 可视化蛋白互作服务 |
| LXPLAC24-1 | PLA 可视化蛋白互作服务 (24 孔板) |
| LXPLAC12-1 | PLA 可视化蛋白互作服务 (12 孔板) |
| LXPLAC06-1 | PLA 可视化蛋白互作服务 (6 孔板) |
| LXPLAT00-1 | PLA 可视化蛋白互作服务 (组织切片) |
| LXPLAM00-1 | PLA 可视化蛋白互作服务 (组织芯片) |
沪公网安备31011502400759号
营业执照(三证合一)
