药物研发体外实验之细胞表面抗原数量测定
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一、细胞表面抗原数量测定

细胞表面抗原表达一般大于5*105时,药物才能发挥较好的杀伤活性,同时靶标的选择与正常组织具有最小的交叉反应性和免疫原性。检测细胞或者组织中的表达可以通过RT-PCR来检测mRNA的表达量或者Western Blot来检测蛋白水平的表达,但是两种技术达不到绝对定量的作用,这里介绍一种用流式细胞术对细胞表面抗原数量进行定量的方法。BD Quantibrite ™ Beads PE Fluorescence Quantitation Kit(340495)。

 

1)基本原理

①建立抗原数量和PE荧光强度之间的数量关系;

②通过测定细胞所带PE荧光强度推算抗原数量。

   

二、应用

受体介导的抗体-药物结合物(Antibody-Drug Conjugates ,ADC)是通过一个化学链接将小分子药物连接到单抗上,单抗会将药物靶向到目标细胞。其中靶点与正常组织具有最小的交叉反应性和免疫原性,细胞表面抗原数量测定可以确实抗原是否具有特异性。

 

  

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