动物实验是疾病基础研究以及转化研究的重要手段,选择合适的动物模型也是实验研究成功的重要因素之一。中国科学院遗传与发育研究所生物学研究中心高级工程师姜韬在接受《中国科学报》记者采访时介绍,实验动物要考虑的因素大概有:容易饲养,繁殖率高,遗传上有较高的纯和度,代谢类型、生理病理尽量与人类接近等。这几点上小鼠具有明显的优势。
01、在科研领域:小鼠造模研究疾病(包括炎症、肿瘤、感染、内分泌、消化系统等)发病机制以及药物活性/作用机制评估等。
02、在转化领域:小鼠造模完成药物临床前研究/评价,包括药理/药效、毒理/毒代、安全性评价等。
小鼠常见的疾病模型
小鼠实验除了观察形态以外,还经常需要采集血浆、尿液以及脑脊液等,检测生理/生化的一些指标变化。但由于动物每次采血量的要求,让科学实验在一定程度上受限。
实验动物采血量要求,来自:Guidelines for Blood Collection in Laboratory Animals
*实验样本量不够/弥足珍贵
*多因子筛选/检测?
*节约成本/提高效率?
*Luminex 多因子检测,仅需 25μL 样本,可完成多达 50 种指标的定量检测。
文献案例分享
01、小鼠模型评估药物/材料安全性
浙江大学医学院附属邵逸夫医院研究团队此前开发了一种新的钙磷(CaP)USNCs,能够完全进入胶原纤维的曲折亚通道(约 1.8-4 纳米),从而较好地恢复骨质疏松症骨骼的功能,比广泛使用的羟基磷灰石纳米颗粒(HANPs)更先进。为了解决 USNCs 在生物安全性和潜在临床应用方面存在的问题,该研究团队以小鼠为模型实验,并在 Bioactive Materials(IF = 16.874)期刊杂志上发表了一篇研究论文,研究采用 R&D 的 Luminex Mouse 多因子检测试剂盒定量血清中细胞因子的表达,辅助评估新型纳米颗粒(钙磷(CaP)USNCs)的生物安全性。
产品:LXSAMSM Luminex Mouse Discovery Assay 指标数量:18
实验对比研究了 CaP USNCs 和 HANPs 在小鼠体内的生物安全差异,基于免疫反应特征、主要器官和局部组织的组织学评估以及全身转录组学综述,结果发现 CaP USNCs 并不比经过 FDA 批准的 HANPs 危险。此项研究成果对于未来临床应用具有重要价值,并引入了一种全身反应评估中的创新策略。
02、小鼠感染模型评估免疫炎症
人呼吸道合胞病毒(hRSV)感染给患者临床带来很多不良结果,从轻微的感冒到严重的细支气管炎甚至是急性间质性肺炎。遗传背景是常被提及的影响临床多样性的因素之一。与此同时,也有研究发现早期感染经历会影响异源感染的严重程度。Gautier Gilliaux 等人为验证该想法,构建了小鼠不同的感染模型(小鼠肺炎病毒(PVM)、鼠疱疹病毒(MuHV-4)),分析 2 个宿主相关因素(基因组成、免疫激活)在塑造宿主对肺炎病毒疾病免疫反应中的重要性。通过 R&D Systems™ Luminex Mouse 多因子检测,评估小鼠在不同感染状态下组织匀浆中促炎和趋化因子的表达。
产品:LXSAMSM Luminex Mouse Discovery Assay 指标数量:22
实验结果发现,在连续接种 MuHV-4 和 PVM 的情况下,先前的 γ 疱疹病毒感染以遗传背景依赖的方式改善了免疫系统对随后肺炎病毒原发感染的反应。此外,MuHV-4 提供的显著固有免疫启动(包括重定向和修饰肺泡巨噬细胞细胞因子和趋化因子)在暴露于 PVM 后立即反应,从而大大减轻宿主的炎症反应和疾病严重程度。
03、小鼠眼部造模实验
视网膜黄斑纤维化常见于新生血管型年龄相关性黄斑变性(nAMD),nAMD 的主要治疗方法是眼内注射 VEGF 抑制剂,但有大约 40%-70% 的治疗患者在 10 年内发展为黄斑纤维化,引起永久性黄斑部结构破坏及不可逆的视力损伤。老年化是导致器官纤维化最主要的因素之一,但是关于衰老增加器官纤维化的机制暂不明确。
2023 年 2 月中南大学爱尔眼科学院、爱尔眼视光研究所徐和平教授团队在 Journal of Neuroinflammation 上发表的文章中,探讨衰老对脉络膜新生血管继发视网膜下纤维化的影响及其机制。研究采用 R&D Systems™ Mouse Luminex 多因子检测对比研究了经 TGF-β1 治疗的年轻/老年鼠以及无/患有视网膜下纤维化的年轻/老年鼠,检测其骨髓来源的巨噬细胞(BMDAs)分泌的细胞因子/趋化因子,结果表明老年鼠来源的 BMDAs 向促血管生成和促纤维化表型发展,特别是在疾病条件下。
产品:LXSAMSM Luminex Mouse Discovery Assay 指标数量:15
研究发现:视网膜损伤修复过程中存在募集纤维细胞/巨噬细胞的视网膜-骨髓-血液-视网膜信号通路,老龄使巨噬细胞促纤维化功能增加,同时募集更多的循环纤维细胞从而加重视网膜黄斑纤维化。该研究阐明了老龄加重视网膜纤维化的机理,为继发 nAMD 黄斑纤维化的临床治疗提供新的思路。
Bio-Techne® 新推出的 Mouse High Performance 系列 Luminex 多因子检测试剂盒,更优异的性能且更大的 Panel,可助力高品质筛选和验证实验。在小鼠珍贵样本和多指标检测实验中大大提高检测效率!
产品名称:Mouse XL Cytokine Luminex® Performance 45-plex Fixed Panel
货号:LKTM015
产品优势
* 单孔可同时检测 45 因子,仅需 25μL/孔;
*灵活度高,可自由组合,同时也是目前市场上小鼠可自由组合的最大 panel;
*Mouse High Performance 系列与金标准 ELISA 做过相关性验证,保证精确性;
*指标全面,包含细胞因子、趋化因子、肿瘤/内分泌/自身免疫等 biomarker;
*批次间一致性高,保证检测结果的稳定性;
*研究领域:免疫、炎症、感染、疫苗、药物疗效/安全性评价等。
指标明细
交叉反应
将抗原添加到 3 倍高标准品浓度的检测液中,检测其交叉反应。所有抗原和 panel 中 45 种分析物的交叉反应性均 < 0.5%。
批间/批内 CV 值
● 批间精确度:在单次实验中,检测 2 个不同浓度的分析物平行实验 40 次计算的平均 CV 值。
● 批内精确度:在 40 次不同的 Assay 中,检测 2 种不同浓度的分析物计算的平均 CV 值。
Bio-Techne 通过严格的 QC 标准保证了批内 CV 控制在 10%,最高仅 5.6%;批间 CV 值 95% 以上的指标控制在 15% 以内,确保检测的性能。