样本前处理是指在进行实验或分析之前对样本进行的一系列处理步骤。这些步骤旨在准备样本，以确保其适合后续实验或分析的要求。样本前处理的具体步骤可以因实验类型和样本类型而异。

用于多重细胞因子检测实验的样本有多种类型，包括血清、血浆、细胞培养上清、尿液以及裂解液等。合适的样本预处理，是确保多因子检测实验准确性的第一步。这里，小备将介绍几种不同的常见样本运输前处理方法：

样本类型

血浆：用含抗凝剂的采血管采血（建议使用EDTA抗凝管），两次离心后取上清，分装后-80℃冻存。避免反复冻融，用干冰运输。

血清：用不含抗凝剂（可以促凝或者空管）的采血管采血，4℃静置2h（避免震动，防止溶血），两次离心后取上清，分装后-80℃冻存。避免反复冻融，用干冰运输。

组织裂解液：将适量裂解液加入组织中（裂解液需要加入蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，20mg组织对应200-300uL裂解液），用组织匀浆仪处理至组织匀浆后，放置于冰箱（4℃，30min）， 两次离心后取上清，组织裂解液需测定BCA总蛋白浓度(建议浓度不低于1mg/mL)。 分装后-80℃冻存，用干冰运输。

细胞裂解液：待收集完细胞样本，用PBS清洗后，加入适量裂解液（裂解液需要加入蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，10⁷个细胞对应200uL裂解液），放置于冰箱（4℃，30min），两次离心后取上清，测定BCA总蛋白浓度(建议浓度不低于1mg/mL)，分装后-80℃冻存，用干冰运输。

细胞培养上清：两次离心后取上清，分装后-80℃冻存，用干冰运输。

注：由于 TGF-β 在物种间有较高的保守性，且动物血清中含有大量的 TGF-β，因此在检测细胞培养上清液样本时，尽量使用无血清培养基。如果已经在培养基中添加了动物血清，可以添加 baseline 的对照，以获得样本中 TGF-β 的准确值。

体液类样本(肺泡灌洗液、尿液、关节滑膜液、脑脊液、痰液、唾液、鼻腔灌洗液等)：两次离心后取上清，分装后-80℃冻存，用干冰运输。

其它样本(鼻腔分泌物、泪液、子宫腔液、阴道分泌物等)：收取样本后将棉签放入“去除底部”的小试管后，套入大试管中，立即用等量生理盐水或样本稀释液完全冲洗棉签（如100uL），离心后取上清（最终上样量不得少于60uL），分装后-80℃冻存，用干冰运输。

适用平台

液相芯片（Luminex）

Luminex技术以荧光编码微球为核心,集流式 原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体，多指标并行分析，最多可一管同时准确定量检测2-100种不同的生物分子; 具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点；可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。

电化学发光技术（MSD）

电化学发光是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，是电化学和化学发光两个过程的完美结合。MSD电化学发光检测技术使用SULFO-TAG标记物，在MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的电极表面通电后，电化学作用激发SULFO-TAG标记物发出强光。

流式液相（CBA）

微球免疫分析系统CBA（Cytometric Bead Array）是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。流式CBA技术可以实现对稀有样本、少量样本的细胞因子、抗体、抗原等多个指标的检测。流式细胞仪以其检测速度快、检测手段灵活、多指标、多参数、灵敏度高等特点已经成为基础科研、临床检测等必不可少的技术手段。

乐备实是国内专注于提供高质量蛋白检测以及组学分析服务的实验服务专家，自2018年成立以来，乐备实不断寻求突破，公司的服务技术平台已扩展到单细胞测序、空间多组学、流式检测、超敏电化学发光、Luminex多因子检测、抗体芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫组化、DSP空间多组学等30多个，建立起了一套涵盖基因、蛋白、细胞以及组织水平实验的完整检测体系。

 
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