ADA的前世今生三| ADA检测中的种属差异与样本类型选择:什么样本最适合ADA检测?
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在前两期的推文中,我们已经深入探讨了ADA(抗药物抗体)的定义、免疫原性以及检测技术(如ELISA和MSD)。今天,我们将聚焦于ADA检测中的两个关键问题:种属差异与样本类型选择。这些问题看似细微,却直接影响检测结果的准确性和可靠性。

             

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一、种属差异:ADA检测的“隐形门槛”
   

在生物制药领域,药物开发往往从动物实验开始,逐步过渡到人体临床试验。然而,不同物种的免疫系统存在显著差异,这直接影响ADA的检测结果。

        

1. 免疫系统差异

人类和动物的免疫系统在结构和功能上存在诸多不同。例如,小鼠的免疫系统对某些抗原的反应更为敏感,而人类的免疫系统则更为复杂且具有更强的耐受性。这种差异使得同一种药物在小鼠体内可能引发强烈的免疫反应,而在人类中却表现温和,甚至无反应。

啮齿类动物(小鼠/大鼠):免疫系统简化,缺乏人类某些免疫调节通路,可能导致低估ADA风险。

非人灵长类(食蟹猴/恒河猴):虽接近人类,但靶蛋白的微小氨基酸差异可能引发交叉反应。

              

2. 药物靶点与种属选择策略

不同物种对药物靶点的免疫反应也存在差异。例如,某些药物在动物模型中表现出良好的疗效,但在人体试验中却因免疫原性问题而失败。可以在药物开发过程中,选择适合的动物模型。

           

        

            

二、样本类型选择:不同的样本,不同的故事

选择合适的样本类型是ADA检测成功的关键。不同的样本类型具有不同的特点和适用场景,根据具体需求进行选择。

           

1. 血清与血浆样本

血清和血浆是最常见的样本类型。它们的采集和处理方法相对简单,且含有丰富的免疫成分,适合大多数ADA检测。

采集与处理:血清是血液凝固后分离出的液体,而血浆则是在血液中添加抗凝剂后分离得到的。血清样本在采集后需静置一段时间,待血液凝固后再离心分离;血浆样本则需在采集后立即离心,避免凝血。

特点:血清样本成分稳定,适合长期保存;血浆样本含有更多的细胞因子和免疫成分,适合检测低丰度的ADA。

适用场景:血清和血浆样本适用于大多数常规ADA检测,尤其是ELISA和MSD等技术。

        

2. 组织样本

组织样本(如肝脏、脾脏等)含有丰富的免疫细胞,适合检测局部免疫反应。

适用场景:当药物可能在特定组织中引发免疫反应时,组织样本是最佳选择。例如,某些药物可能在肝脏中代谢后产生免疫原性。

采集与处理:取组织样本,剪碎,加入组织裂解液,进行匀浆处理,两次离心后取上清再进行检测。

            

3. 体液样本(如唾液、尿液等)

唾液和尿液等体液样本虽然含有ADA,但其丰度较低,检测难度较大。

采集与处理:两次离心后取上清,分装后-80℃冻存。

低丰度样本的检测挑战:唾液和尿液中的ADA浓度较低,需要高灵敏度的检测技术,如MSD或Luminex。

   

三、样本处理与保存:细节决定成败

样本的处理和保存是ADA检测中不可忽视的环节。正确的处理和保存方法可以确保样本的完整性和稳定性,从而提高检测结果的可靠性。

1. 采集后的初步处理

样本采集后需尽快进行初步处理,避免降解或变性。

抗凝剂选择:

   

2. 保存方法

血液样本:采集后需在2小时内分离血清/血浆,4℃暂存;

长期保存:-80℃分装(避免反复冻融),可稳定保存1年以上。

3. 运输注意事项

样本在运输过程中需严格控制温度和时间。血清、血浆和组织样本需在干冰中运输,避免反复冻融,确保低温条件。

    

选择合适的样本,为ADA检测保驾护航

在ADA检测中,种属差异和样本处理是影响检测结果的关键因素。唯有打通这两大关卡,方能实现从实验室到临床的精准转化!

  


  

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