[ “罗工，我最近想做一批流式，检测一下巨噬细胞，看文献是用F4/80进行标记你看可以吗？”

“您做哪种样本的呢？”

“我们样本是人的外周血”

“那这个指标不一定对哦，你看看你的参考文献是不是用的小鼠样本？“

“嘿，还真是。。那人的巨噬细胞用什么呢?差点就踩了大雷了。。”

“别急，我来帮你总结一下不同种属中各类免疫细胞的特异性标记物吧” ]

总的来说，咱们动物体内的免疫细胞基本分为了淋巴亚群和髓系亚群。

淋巴亚群主要由T,B,NK三类细胞组成，辅以少量的固有免疫细胞；而髓系细胞主要由单核，粒细胞，巨噬细胞等组成，特殊条件下还会存在MDSC等细胞。另外就是树突细胞，他本身存在pDC和cDC两种形态，算是一个特例。

在人的样本中，我们通常会测定外周血pbmc中的免疫细胞，这时候常用的特异性标记物如下：

首先值得一提的就是单核细胞，很多老文里提出CD14+就是单核细胞，但是实际上单核细胞分为classical (CD14++CD16−), intermediate (CD14++ CD16+),和non-classical(CD14+CD16++)monocytes：

图片出处：https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC6077321/

其次比较容易弄错的就是很多老师会单纯的认为CD11c就是DC细胞了，而实际上CD11c+只能算是DC的一部分（髓系DC），如果我们要完整的得到所有DC细胞，应该考虑对其进行如下分群：

Ps： “lin” cocktail：CD3/CD14/CD16/CD19/CD56

图片出处：https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC6328029/ 

另外还有一类比较特殊的细胞是MDSC细胞，这类细胞在正常人体内是非常少的，文献报道他的表型都是基于CD11b+的免疫抑制性的细胞，所以常见标记物多数文献选择了CD11b+CD33+HLA-DR-：

图片出处：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6026688/

最后就是文章开头提到的巨噬细胞了，目前大部分人类的巨噬细胞是采用的CD11b+CD68+进行标记的，但是值得注意的是CD68是一类跨膜蛋白，在单纯的表面染色中他的染色效率往往不是那么让人满意，如果需要得到更明显的阳性信号，笔者是建议对样本进行固定破膜后再染色的：

图片出处：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC9082192/

[ “太感谢罗老师了，这样我就对巨噬细胞的鉴定心里有谱了，不过我后面还打算做Th细胞亚群，他们的特异性标记物又有哪些呢？” ]

其实，对于人的Th细胞亚群的标记物选择，是经历了一个由复杂，到简单的过程的，传统的人th细胞亚群的标记物，是遵循着这些细胞亚群分泌因子来进行鉴定的，例如我们认为能分泌IFN-g的CD4细胞就是Th1细胞，而能分泌IL-4的就是Th2细胞，但是由于IFN-g和IL-4这些分泌因子本身难以分泌，并且染色也比较困难，所现在多数临床科研流式都选择了一些趋化因子受体来进行人Th细胞以及Treg细胞的鉴定，具体指标如下：

伴随着时间的发展，越来越多的文献中也选择这种方式来鉴定人的T细胞亚群：

图片出处：https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC10260734/

[ “果然又学到了一些!接下来只要搞定配色就可以买抗体做实验啦！”

“别着急，我们优宁维是有专业的流式配色工具可以使用的哦！咱们打开微信，寻找流式专家这个公众号，里面就有免费的流式配色工具（可直接点击进行跳转）哦！”

“那太感谢罗老师了！我这就去试一试~，另外罗老师如果后面我们要做其他种属的免疫细胞，又有哪些特异性标记物呢？”

“本期篇幅有限，那我们就留到下期给大家分享吧；）”

各位老师，除了人的各类免疫细胞标记物，你想知道什么种属的免疫细胞标记物呢？欢迎大家留言，我们会根据留言的热度优先给大家整理下一期哦；） ]

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