细胞分选的定义与重要性
常见细胞分选方法概述
流式细胞分选
(一)技术原理
流式细胞分选技术原理:基于细胞荧光和物理特性进行高速分选。流式细胞分选在流式细胞术检测细胞表型基础上,借助充电分选技术分离多种特定表型细胞。分选型流式细胞仪由液流、光路、检测分析和分选系统组成。其分选依赖鞘液流形成的带电液滴:流动室喷嘴的高速振荡器以每秒几万次频率使鞘液流分裂为液滴,细胞进入液滴前已被测定,符合分选特性的细胞形成液滴时,液柱被充以指定电荷(带荧光素的带负电,未标记的带正电,无细胞的不带电)。带电液流经高压电场偏转板时,依电荷性质偏转入对应收集管,未带电液滴入废液槽,完成分选。
(二)技术优势

(三)应用领域

免疫磁性细胞分选
(一)技术原理
(二)技术优势
(三)分选策略
按标记细胞不同,分阳性、阴性和复合分选。阳性分选是将特异性抗体连磁珠后与混合细胞孵育,磁分离获取目的细胞;阴性分选通过去除非目的细胞得到目的细胞,但靶细胞比例低时易因非特异性吸附损失;复合分选联合多种策略,如先阴选去杂再阳选获目的细胞,用于细胞亚群或高纯度稀有细胞分选。
按分选方法不同,分直接和间接分选。直接分选将抗体包被磁珠形成复合颗粒,与细胞孵育后,带磁珠的目的细胞在磁场中滞留;间接分选先让细胞与一抗孵育,清洗后加包被二抗的磁珠,借助抗原抗体作用使磁珠结合目的细胞,磁场中滞留实现分选。
细胞分选方法的选择
流式细胞分选的注意事项
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