细胞分选的定义与重要性
细胞分选（cell sorting）是依据细胞特性从混合样品中分离特定细胞亚群的技术，在细胞学研究中至关重要。无论是通过 ELISA 分析细胞培养上清液中的分子，还是进行细胞共培养检测功能，获得高纯度目的细胞都是后续研究的前提。只有保证目的细胞纯度，才能确保实验结果准确可靠，为探索细胞生物学特性和功能奠定基础。
常见细胞分选方法概述
细胞分选方法主要分两类。一类基于免疫识别特性，包括流式细胞分选和免疫磁性细胞分选，二者以高特异性和高效性在科研与临床中广泛应用。另一类是基于细胞物理性质的密度梯度离心法，利用不同细胞沉降系数差异，在离心力作用下于密度梯度区形成区带实现分选。但该方法细胞纯度低、特异性差，应用受限，本文重点介绍前两种基于免疫识别的方法。
流式细胞分选
（一）技术原理
流式细胞分选在流式细胞术检测细胞表型基础上，借助充电分选技术分离多种特定表型细胞。分选型流式细胞仪由液流、光路、检测分析和分选系统组成。其分选依赖鞘液流形成的带电液滴：流动室喷嘴的高速振荡器以每秒几万次频率使鞘液流分裂为液滴，细胞进入液滴前已被测定，符合分选特性的细胞形成液滴时，液柱被充以指定电荷（带荧光素的带负电，未标记的带正电，无细胞的不带电）。带电液流经高压电场偏转板时，依电荷性质偏转入对应收集管，未带电液滴入废液槽，完成分选。
（二）技术优势
流式细胞分选优势显著，可多参数分选多个细胞群体，纯度高且灵活性强。分选后的细胞可用于荧光定量 PCR、WB、细胞培养等分子生物学研究，为探究细胞分子机制提供高质量材料。
（三）应用领域
流式细胞分选广泛应用于免疫学、细胞生物学、肿瘤学等领域。如分选外周血白细胞获取单核细胞，纯度达 80%-90%，避免多次离心的细胞损伤；还可分选高质量单个染色体并同时纯化大量染色体，助力染色体研究；在干细胞研究、移植治疗及疾病细胞发生发展研究中也作用重大。
免疫磁性细胞分选
（一）技术原理
免疫磁珠细胞分选基于细胞表面抗原与连接磁珠的特异性抗体结合特性。在外加磁场中，与磁珠相连的细胞被吸附滞留，无对应表面抗原的细胞因不结合磁珠、无磁性而不滞留，实现分离。
（二）技术优势
该技术设备简单，对操作人员要求低，分选细胞灵敏度高、纯度好，活性和复苏率佳，对下游应用影响小，应用前景广阔。
（三）分选策略
免疫磁珠分选可按不同标准分类。
按标记细胞不同，分阳性、阴性和复合分选。阳性分选是将特异性抗体连磁珠后与混合细胞孵育，磁分离获取目的细胞；阴性分选通过去除非目的细胞得到目的细胞，但靶细胞比例低时易因非特异性吸附损失；复合分选联合多种策略，如先阴选去杂再阳选获目的细胞，用于细胞亚群或高纯度稀有细胞分选。
按分选方法不同，分直接和间接分选。直接分选将抗体包被磁珠形成复合颗粒，与细胞孵育后，带磁珠的目的细胞在磁场中滞留；间接分选先让细胞与一抗孵育，清洗后加包被二抗的磁珠，借助抗原抗体作用使磁珠结合目的细胞，磁场中滞留实现分选。
细胞分选方法的选择
流式细胞分选与免疫磁性细胞分选各有优势，无法替代。流式可多参数及不同荧光强度分选，设备要求高、对细胞刺激大，但灵活性强；磁珠分选操作简、速度快、细胞活性好，设备和人员要求低，但仅能单标记分选。实际应用中，若磁珠分选满足需求则优先选用，否则考虑流式分选。
流式细胞分选的注意事项
以下情况只能用流式细胞分选：需获得 95%-100% 高纯度目标群体；分离表面低密度受体群体；依表面受体密度浓缩不同表达量群体；基于多色染色或内部染色（如 DNA、胞内抗原）分选细胞。这些场景下，流式能更好满足需求，保证分选质量。
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