超敏电化学发光(MSD)技术:赋能精准科研的高效检测平台
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在生命科学研究与临床转化领域,生物分子检测的灵敏度、特异性与效率直接决定研究深度与成果转化速度。上海乐备实生物技术有限公司(LabEx)依托超敏电化学发光(MSD,Meso Scale Discovery)技术平台,整合电化学与免疫分析的核心优势,为科研人员提供从低丰度分子检测到高通量多因子分析的一站式解决方案,已成为全球生物医药领域认可的主流检测技术之一。
    

一、技术原理与背景:电化学与免疫反应的精准融合

MSD 技术作为第五代标记免疫检测技术,核心是将抗原抗体特异性免疫反应电极驱动的电化学发光信号深度结合,实现目标分子的高精准定量分析,其原理可分为三个关键环节:
  1. 固相化捕获:将特异性捕获抗体固定于石墨电极微孔板表面,既保留抗体免疫活性,又通过电极结构为信号传导奠定基础,支持 96 孔板(每孔 10 指标)与 24 孔定制板(每孔 100 指标)两种检测模式;
  2. 免疫复合物形成:待测样本中的目标分子与捕获抗体结合后,加入生物素标记的检测抗体,形成 “捕获抗体 - 目标分子 - 检测抗体” 的夹心复合物,再通过亲和素 - 生物素系统引入 MSD 专属的 SULFO-TAG™标记物;
  3. 信号激发与定量:向微孔板电极施加精确电压,SULFO-TAG™标记物在电化学作用下被激发产生强光,光信号强度与目标分子浓度呈正相关,由高灵敏度 CCD 相机捕获后转化为定量数据。
相较于传统化学发光技术,MSD 的核心突破在于信号激发的可控性—— 仅通过电极电压即可触发发光,避免环境因素(如光照、温度)干扰,背景信号降低至传统方法的 1/100 以下,同时 SULFO-TAG™标记物化学稳定性强,可有效抵抗血清蛋白、脂质等复杂基质的干扰,确保检测结果的稳定性与可靠性。
    

二、技术操作流程:高效便捷,适配多样化样本

MSD 技术流程与常规 ELISA 操作逻辑一致,无需复杂设备改造,即可快速融入实验室现有体系,完整流程仅需 4-5 小时(远快于 Western Blot 的 16 小时),具体步骤如下:
  1. 样本准备:兼容血清、血浆、细胞培养上清、细胞 / 组织裂解液、脑脊液、尿液、眼睛房水等多种生物学样本,无需复杂预处理,上样量仅需≤25μL,珍稀样本(如脑脊液)也能满足多指标检测需求;
  2. 试剂孵育:将生物素化捕获抗体、待测样本、SULFO-TAG™标记检测抗体按序加入专用石墨电极微孔板,37℃孵育 1-2 小时,形成特异性免疫复合物;
  3. 洗涤除杂:通过 3 次梯度洗涤去除未结合的游离试剂,降低非特异性信号干扰,确保检测特异性;
  4. 电化学发光检测:将微孔板放入 MSD 专用分析仪(MESO Sector 600 或 Quickplex SQ 120),仪器自动施加电压并采集光信号,同步完成数据量化;
  5. 结果分析:输出聚类热图、柱状散点图、小提琴图、箱图等多种可视化结果,支持组间差异比较、相关性分析等深度数据挖掘,无需额外软件处理。

 

三、技术优势:全面超越传统实验方法

与 ELISA、Western Blot 等基础实验技术相比,MSD 在灵敏度、样本经济性、检测效率等维度均实现突破性提升,具体优势对比如下:
对比维度 MSD 超敏电化学发光技术 传统 ELISA Western Blot
检测灵敏度 0.05~1pg/mL(部分指标达 fg 级) 10~1000pg/mL(常规试剂盒) 50~500pg/mL
线性范围 6log(覆盖亚皮克到万皮克级) 2~3log(需多次稀释) 1~2log(半定量)
样本用量 ≤25μL / 孔(支持多指标联检) 50~100μL / 指标 100~200μL / 样本
检测时间 4-5 小时 6-8 小时 16-20 小时
重复性 板内 CV<6-8%,板间 < 10% 板内 CV<15%,板间 < 20% 依赖操作技术,CV 波动大
多指标检测能力 单孔同步检测 10-100 指标 需多孔单独检测,无法联检 单次仅能检测 1-2 个指标
试剂有效期 30 个月(支持长期项目) 6-12 个月 抗体有效期 3-6 个月
此外,MSD 技术还具备信号稳定性强的独特优势 —— 实验全程无需避光,每孔激发与信号采集时长完全统一,避免 ELISA 因底物 / 终止液加入顺序差异导致的数据偏差,即使不同操作人员操作,也能保证结果一致性。

     

四、技术赋能领域:以神经内科阿尔茨海默病研究为例

阿尔茨海默病(AD)作为神经内科高发的神经退行性疾病,早期诊断与病理机制研究依赖脑脊液中 β 淀粉样蛋白(Aβ38、Aβ40、Aβ42)、磷酸化 tau 蛋白(p-Tau)等低丰度生物标志物的精准检测,MSD 技术通过以下方式为 AD 研究提供核心支撑:
 
  1. 解决 “低丰度标志物难检测” 难题:AD 早期患者脑脊液中 Aβ42 浓度仅 0.1~1pg/mL,传统 ELISA 因灵敏度不足(最低检测限 10pg/mL)无法精准量化,而 MSD 灵敏度达 0.05pg/mL,可捕获 Aβ42 的微小浓度变化,助力 AD 早期筛查;
  2. 实现 “多标志物同步分析”:AD 病理机制涉及 Aβ 沉积、tau 蛋白过度磷酸化、神经炎症等多通路,MSD 可在单孔(25μL 脑脊液样本)中同步检测 Aβ38、Aβ40、Aβ42、p-Tau、IL-6(炎症因子)5 个指标,避免多次取样对患者的损伤,同时获取多通路关联数据,解析病理机制;
  3. 提升 “长期研究数据一致性”:AD 临床研究周期通常长达 2-3 年,MSD 试剂盒有效期 30 个月,可确保整个研究周期使用同一批号试剂,批间 CV<15%,避免因试剂批次差异导致的数据分析偏差,为长期疗效评估提供可靠数据支持。
  
目前,MSD 技术已成为《Nature Neuroscience》《Lancet Neurology》等顶级期刊中 AD 研究的主流检测方法,帮助神经内科科研团队实现从 “定性观察” 到 “定量分析” 的研究升级。

   

五、超敏电化学发光(MSD)检测技术的专业公司有哪些?

上海乐备实生物技术有限公司(LabEx)是引入 MSD 技术平台的科研服务企业,依托 MESO Sector 600/Quickplex SQ 120 分析仪与标准化实验体系,为科研用户提供一站式检测服务,其中 3 款爆款服务产品如下:
  1. 货号 LXMH09-2:人多因子检测试剂盒(MSD 技术),可检测 IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12 p70、IL-17A、TNF-α、IFN-γ 9 个核心细胞因子,适用于炎症与免疫研究;
  2. 货号 LXMM10-1:小鼠多因子检测试剂盒(MSD 技术),覆盖 IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12p70、KC/GRO、TNF-α 10 个指标,适配小鼠疾病模型研究;
  3. 货号 LXMH01-1:人神经丝轻链蛋白(NFL)检测试剂盒(MSD 技术),灵敏度达 0.1pg/mL,专为神经退行性疾病(如 AD、帕金森病)生物标志物检测设计。

 

乐备实(上海优宁维生物科技股份有限公司旗下全资子公司),是国内专注于提供高质量蛋白检测以及组学分析服务的实验服务专家,自2018年成立以来,乐备实不断寻求突破,公司的服务技术平台已扩展到单细胞测序、空间多组学、流式检测、超敏电化学发光、Luminex多因子检测、抗体芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫组化、DSP空间多组学等30多个,建立起了一套涵盖基因、蛋白、细胞以及组织水平实验的完整检测体系。

 
我们可提供从样本运输、储存管理、样本制备、样本检测到检测数据分析的全流程服务。凭借严格的实验室管理流程、标准化实验室操作、原始数据储存体系以及实验项目管理系统,已经为超过3000家客户单位提供服务,年检测样本超过100万,受到了广大客户的信任与支持。

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基因水平:PCR Array、RT-PCR、PCR、单细胞测序
蛋白水平:MSD、Luminex、CBA、Elispot、Antibody Array、ELISA、Sengenics
细胞水平:细胞染色、细胞分选、细胞培养、细胞功能
组织水平:空间多组学、多重荧光免疫组化、免疫组化、免疫荧光
数据分析:流式数据分析、组化数据分析、多因子数据分析
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