窥见免疫应答:ELISpot 技术原理及应用全解
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生物医学不断突破,精准解析、量化免疫系统功能的重要性日益凸显。作为免疫检测领域的高效利器,酶联免疫斑点技术(ELISpot)成为解锁免疫奥秘的关键手段 —— 它能精准捕捉单个免疫细胞分泌的细胞因子等分子,为免疫应答研究打开全新思路。

   

小备带你走进 ELISpot 的世界,一同揭开免疫反应背后的神秘面纱!

 一、ELISpot技术介绍

酶联免疫斑点技术(Enzyme Linked ImmunoSpot Assay,ELISpot)是在ELISA 基础上迭代创新的单细胞功能检测技术。其技术溯源至 1978 年,牛津大学 Don Mason 教授率先建立 “胶片斑点技术”,实现抗体分泌细胞的初步检测;1983 年,J.D. Sedgwick 与 C. Czerkinsky 分别独立完成技术升级,引入酶联免疫反应体系,显著提升检测实用性与灵敏度。
ELISpot 可单细胞水平定量分析细胞因子 / 抗体分泌水平,实现对样本活细胞免疫状态的动态监测与功能评估。检测原理如图所示:细胞接种于包被特异性捕获抗体的 PVDF 微孔板,分泌的靶标蛋白被原位捕获;去除细胞后加入生物素标记二抗,经酶促显色反应形成可见显色斑点(Spot)。
该技术兼具高灵敏度、高通量、活细胞功能解析、操作便捷等核心优势,已广泛应用于疫苗研发、药物筛选、感染性疾病诊疗 [5]、肿瘤免疫 [6]、自身免疫病、变态反应及移植排斥预警等免疫相关研究领域。
 
ELISpot原理图(图源网络,侵删)
   
二、ELISpot与ELISA对比
从技术核心原理来看,ELISpot 与 ELISA 均依托双抗体夹心法建立检测体系,但二者检测维度存在本质差异:ELISA 旨在对样本溶液中游离靶标蛋白进行总量定量分析,而 ELISpot 则聚焦于活细胞层面,实现对细胞免疫功能状态的动态监测与功能评估,具体对比如下。
 
以上是ELISpot 凭借原理优势与性能特点,在疫苗研发、肿瘤免疫治疗等领域展现出广阔应用前景与巨大研究价值。伴随生物技术的持续迭代与突破,ELISpot 技术将进一步拓展应用边界,为人类健康事业发展提供关键技术支撑。
  
三、Elispot酶联免疫斑点技术检测服务哪里有?
乐备实LabEx提供Elispot酶联免疫斑点技术检测服务:
 
货号 产品名
LXEMS01-1 小鼠IFN-γ单色Elispot(酶标)Panel检测服务
LXEHS01-1 人IFN-γ单色Elispot(酶标)Panel检测服务
LXEHS02-1 人IL-2单色Elispot(酶标)Panel检测服务

 

乐备实(上海优宁维生物科技股份有限公司旗下全资子公司),是国内专注于提供高质量蛋白检测以及组学分析服务的实验服务专家,自2018年成立以来,乐备实不断寻求突破,公司的服务技术平台已扩展到单细胞测序、空间多组学、流式检测、超敏电化学发光、Luminex多因子检测、抗体芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫组化、DSP空间多组学等30多个,建立起了一套涵盖基因、蛋白、细胞以及组织水平实验的完整检测体系。

 
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基因水平:PCR Array、RT-PCR、PCR、单细胞测序
蛋白水平:MSD、Luminex、CBA、Elispot、Antibody Array、ELISA、Sengenics
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组织水平:空间多组学、多重荧光免疫组化、免疫组化、免疫荧光
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