蛋白多因子【抗体芯片】检测技术全解析:原理、优势与应用场景
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蛋白多因子检测(以抗体芯片为核心代表)是生命科学领域成熟应用的高通量研究技术,可对单一样本中多种低丰度功能蛋白实现同步定性与定量分析;搭配高通量上样体系,单次实验即可完成多样本、多指标的并行检测,在提升实验效率的同时,显著降低人工与经费成本。
  
省时   省力  省人工   省经费
 
借助该技术,单次实验即可产出媲美质谱的组学级蛋白表达谱。通过组间差异比对可快速筛选出关键差异因子,结合数据库富集分析,可进一步挖掘与研究主题相关的分子功能、疾病关联及信号通路上下游调控网络,真正实现高通量筛选、大数据输出,为高水平研究提供核心数据支撑。
  
高通量  大数据  大文章
 

蛋白多因子检测的多元应用场景

蛋白多因子检测技术适配多领域研究需求,覆盖从基础科研到产业转化的全链条场景:
在基础生物学研究中,同步解析样本中多种功能靶标的表达水平,可系统呈现样本的炎症反应、趋化调控、免疫状态等分子特征,同时覆盖信号转导活性、蛋白磷酸化水平等多维度信息。该技术既适用于研究前期的方案设计与靶点初筛,也可用于研究后期的结果验证与机制补充,可贯穿研究项目全流程。
 
在临床医学、中医药研究、药学及流行病学领域,结合大队列样本开展蛋白多因子检测,可高效推进疾病发病机制解析、关键生物标志物筛选、治疗药物靶点发掘及临床治疗方案优化等研究,为转化医学研究提供高效技术支撑。
 
在功能性食品、环境科学、生物材料等与人类健康改善、寿命延长相关的研究方向中,蛋白多因子评估同样具备重要应用价值。通过检测不同实验组中微量功能蛋白的表达差异,可客观评估研发产品的生物功效与作用特点。
 

蛋白多因子检测的核心技术优势

相较于 WB、ELISA 等传统单靶标检测技术,蛋白多因子检测除指标覆盖广的核心特点外,还具备多方面显著优势:

(1)操作简便,实验室适配性强

实验流程无需复杂的样本前处理,无需高温煮沸,也不依赖专用特殊仪器。

  • 样本处理:血清、血浆样本仅需简单稀释即可上样;细胞、组织等样本仅需常规破碎裂解,无需煮沸变性;
  • 实验流程:将样本与预包被捕获抗体的芯片共同孵育,经洗涤、二抗孵育、显色底物反应后,即可通过荧光扫描仪读取信号,整体操作逻辑与 ELISA 高度相似;
  • 场地适配:常规开展 WB 实验的实验室即可满足全部实验条件。
 
(2)样本用量极低
单次检测最低仅需 10μL 样本,即可完成 20 种以上因子的同步检测,尤其适用于临床珍贵样本、微量实验样本的多指标分析,最大程度节约样本资源。
 
(3)样本兼容性广泛
除血清、血浆、细胞裂解液等常规样本类型外,灌洗液、组织冲洗液、尿液、乳汁等各类科研样本均可适配检测。
 
(4)检测灵敏度优异
基于与 ELISA 一致的抗原抗体特异性结合原理,检测灵敏度可达 pg 级别,可精准捕捉低丰度蛋白的细微表达变化,保障弱表达靶标的检测可靠性。
 
   

主流多因子检测技术原理

目前蛋白多因子检测技术已衍生出多条技术路线,其中高灵敏度的检测方案均以抗原抗体特异性结合为核心基础。市面上主流的高灵敏多因子检测试剂盒,主要采用以下三类技术原理:

双抗夹心法

将所有靶标对应的捕获抗体按预设阵列固定在修饰后的载玻片或 NC 膜表面,与样本中对应靶蛋白结合后,再加入生物素标记的检测抗体形成夹心复合物,通过 HRP 底物显色或 CY3 荧光信号激发,依据荧光或显色强度实现多因子的准确定量,是目前抗体芯片最主流的检测模式。
 

流式微球技术

该技术同样基于双抗夹心免疫分析原理,将不同靶标的捕获抗体包被在具备不同粒径、不同荧光强度(如 APC 标记)的编码微球上,检测抗体则携带另一种荧光标记(如 PE 标记)。样本孵育反应完成后,通过标准流式细胞仪平台,对液相体系中的多种可溶性蛋白进行一次性定量分析,兼具高通量与高准确性特点。
 

标记法

先对样本中的总蛋白进行生物素标记,再与预包被一抗的芯片结合,后续通过 HRP 底物或 CY3 荧光激发读取信号,实现多因子的半定量检测,适用于大规模样本的初筛场景。
 

技术应用前景

随着生命科学研究的不断突破,科研探索的边界持续拓展。面对复杂的分子调控网络与多样的科研难题,能够快速锁定核心靶点、提升研究精准度的高通量技术,将成为突破科研瓶颈的关键工具。蛋白多因子检测技术凭借其高效、稳定、高适配的特点,未来将在更多研究领域发挥核心支撑作用,助力科研工作者高效推进研究进程。
 

蛋白检测抗体芯片检测哪里有?

乐备实(LabEx)可提供蛋白检测抗体芯片检测服务,支持样本接收、标准化实验检测与配套数据分析。

 

服务货号 中文名称 应用方向 检测指标
LXAH049-1 人 RTK 磷酸化抗体芯片 Panel (49 因子) RTK 磷酸化 ALK/CD246,EphB4,MuSK,Axl,EphB6,PDGF R alpha,DDR1,ErbB2,PDGF R beta,DDR2,ErbB3,c-Ret,Dtk,ErbB4,ROR1,EGF R,FGF R1,ROR2,EphA1,FGF R2 alpha,Ryk,EphA2,FGF R3,SCF R/c-kit,EphA3,FGF R4,Tie-1,EphA4,Flt-3,Tie-2,EphA5,HGF R/c-MET,TrkA,EphA6,IGF-I R,TrkB,EphA7,Insulin R/CD220,TrkC,EphA10,M-CSF R,VEGF R1/Flt-1,EphB1,Mer,VEGF R2/KDR,EphB2,MSP R/Ron,VEGF R3/Flt-4,EphB3
LXAH041-1 人磷酸激酶抗体芯片 Panel (41 因子) 磷酸激酶 Akt 1/2/3 (S473),HSP60,PRAS40 (T246),Akt 1/2/3 (T308),JNK 1/2/3 (T183/Y185,T221/Y223),Pyk2 (Y402),beta-Catenin,Lck (Y394),RSK1/2 (S221/S227),Chk-2 (T68),Lyn (Y397),RSK1/2/3 (S380/S386/S377),c-Jun (S63),MSK1/2 (S376/S360),Src (Y419),CREB (S133),p38 alpha (T180/Y182),STAT1 (Y701),EGF R (Y1086),p53 (S15),STAT2 (Y689),eNOS (S1177),p53 (S392),STAT3 (S727),ERK1/2 (T202/Y204,T185/Y187),p53 (S46),STAT3 (Y705),Fgr (Y412),P70 S6 Kinase (T389),STAT5a/b (Y699),GSK-3 alpha/beta (S21/S9),p70 S6 Kinase (T421/S424),STAT6 (Y641),GSK-3 beta (S9),PDGF R beta (Y751),WNK-1 (T60),HSP27 (S78/S82),PLC gamma-1 (Y783),Yes (Y426)
LXAH059-1 人免疫受体磷酸化抗体芯片 Panel (59 因子) 免疫受体 2B4/SLAMF4,FcRH1/IRTA5,NKp46/NCR1,BLAME/SLAMF8,FcRH2/IRTA4,NKp80/KLRF1,BTLA,FcRH4/IRTA1,NTB-A/SLAMF6,CD3 epsilon,FcRH5/IRTA2,PD-1,CD5,ILT2/CD85j,PECAM/CD31,CD6,ILT3/CD85k,SHIP-1,CD28,ILT4/CD85d,SHP-1,CD84/SLAMF5,ILT5/CD85a,SHP-2,CD229/SLAMF3,ILT6/CD85e,Siglec-2/CD22,CEACAM-1,Integrin beta 3/CD61,Siglec-3/CD33,CLEC-1,KIR2DL4,Siglec-5,CLEC-2,LAIR-1,Siglec-7,CRACC/SLAMF7,LAIR-2,Siglec-9,CTLA-4/CD152,LMIR1/CD300A,Siglec-10,DCIR/CLEC4A,LMIR2/CD300C,SIRP-beta 1,Dectin-1/CLEC7A,LMIR3/CD300LF,SLAM/CD150,DNAM-1,LMIR6/CD300LE,TREM-1,Fc epsilon RII/CD23,MDL-1/CLEC5A,TREM-2,Fc gamma RIIA,NKp30/NCR3,TREML1/TLT-1,Fc gamma RIIIA/B,NKp44/NCR2
LXAH036-1 人细胞凋亡抗体芯片 Panel (36 因子) 凋亡相关 Bad,TRAIL R1/DR4,PON2,Bax,TRAIL R2/DR5,p21/CIP1/CDNK1A,Bcl-2,FADD,p27/Kip1,Bcl-x,Fas/TNFSF6,Phospho-p53 (S15),Pro-Caspase-3,HIF-1 alpha,Phospho-p53 (S46),Cleaved Caspase-3,HO-1/HMOX1/HSP32,Phospho-p53 (S392),Catalase,HO-2/HMOX2,Phospho-Rad17 (S635),cIAP-1,HSP27,Pro-Caspase-3,-cIAP-2,HSP60,SMAC/Diablo,Claspin,HSP70,Survivin,Clusterin,HTRA2/Omi,TNF RI/TNFRSF1A,Cytochrome c,Livin,XIAP

 

乐备实(上海优宁维生物科技股份有限公司旗下全资子公司),是国内专注于提供高质量蛋白检测以及组学分析服务的实验服务专家,自2018年成立以来,乐备实不断寻求突破,公司的服务技术平台已扩展到单细胞测序、空间多组学、流式检测、超敏电化学发光、Luminex多因子检测、抗体芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫组化、DSP空间多组学等30多个,建立起了一套涵盖基因、蛋白、细胞以及组织水平实验的完整检测体系。

 
我们可提供从样本运输、储存管理、样本制备、样本检测到检测数据分析的全流程服务。凭借严格的实验室管理流程、标准化实验室操作、原始数据储存体系以及实验项目管理系统,已经为超过3000家客户单位提供服务,年检测样本超过100万,受到了广大客户的信任与支持。

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基因水平:PCR Array、RT-PCR、PCR、单细胞测序
蛋白水平:MSD、Luminex、CBA、Elispot、Antibody Array、ELISA、Sengenics
细胞水平:细胞染色、细胞分选、细胞培养、细胞功能
组织水平:空间多组学、多重荧光免疫组化、免疫组化、免疫荧光
数据分析:流式数据分析、组化数据分析、多因子数据分析
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