肿瘤免疫治疗通过激活机体免疫系统对抗肿瘤，已成为癌症治疗的重要突破，但仅 20%-40% 的实体瘤患者对免疫检查点抑制剂（ICB）等疗法产生持久应答，耐药性和治疗毒性仍是亟待解决的难题。循环蛋白作为反映免疫系统与肿瘤动态相互作用的关键标志物，其检测对免疫治疗研究至关重要。Olink 蛋白组学技术基于专利的邻近延伸分析（PEA）原理，在微量样本中实现高通量、高灵敏的蛋白检测，为肿瘤免疫治疗的生物标志物发现和机制研究提供了强有力的工具。
蛋白组学 Olink 技术原理：基于邻位延伸技术，实现超高灵敏度多重蛋白检测。Olink 技术通过双抗体识别靶蛋白，抗体偶联的 DNA 寡核苷酸在靶蛋白结合时邻近延伸，经 PCR 扩增后实现定量检测。这种 "双抗体识别 + DNA 扩增" 的设计，既保证了检测特异性，又突破了传统免疫检测的灵敏度限制。
超高灵敏度：检测下限达 fg/ml 级别，可精准捕捉血浆中低丰度细胞因子、免疫检查点分子等，满足肿瘤免疫微环境中微量信号分子的检测需求；
微量样本兼容：仅需 1-4μL 体液样本即可完成检测，适合纵向研究中对患者有限样本的多次分析；
高通量检测能力：通过不同检测面板可同步分析数十至 1536 种蛋白，覆盖免疫调节、肿瘤增殖等多个通路；
高重复性：批内与批间变异系数通常低于 10%，确保多中心研究数据的一致性。
麻省总医院团队联合开展的研究纳入 200 例转移性黑色素瘤患者，利用 Olink 技术分析 ICB 治疗前后的血浆样本。通过 Target 平台检测 700 余种蛋白，再经 Explore 平台验证 1500 种蛋白，发现髓系细胞来源的趋化因子（如 CCL2、CXCL10）与 PD-1 抑制剂应答显著相关 —— 高表达者客观缓解率提升 37%，无进展生存期延长近 2 倍。结合单细胞测序证实，这些趋化因子由肿瘤微环境中的 M2 型巨噬细胞分泌，提示其可能参与 ICB 耐药机制。
荷兰马斯特里赫特大学的研究利用 Olink 技术追踪 III 期 NSCLC 患者放化疗联合 PD-L1 抑制剂治疗中的蛋白动态变化。结果显示，放疗后 IL-1β、HMGB1 等免疫原性细胞死亡标志物的升高幅度，可预测后续 PD-L1 抑制剂的应答率（AUC=0.78）；同时发现放疗后 PD-L1 与 VEGF 同步上调的患者，接受三联治疗（放疗 + 抗 PD-L1 + 抗血管生成）的客观缓解率较单纯放免联合提高 29%，为治疗方案优化提供了分子依据。
Olink 技术被纳入美国国立癌症研究院的 CIMAC-CIDC 网络，作为细胞因子和趋化因子检测的标准方法，用于统一多中心免疫治疗临床试验的数据。该网络通过 Olink 技术整合 5000 余例患者的血浆蛋白数据，建立了免疫治疗应答相关的蛋白图谱数据库，加速了生物标志物的跨研究验证。
治疗应答预测：通过检测基线和治疗早期的循环蛋白谱，识别对 ICB、CAR-T 等疗法敏感的患者亚群，如黑色素瘤中 IL-2、IFN-γ 高表达者对 PD-1 抑制剂应答更佳；
耐药机制解析：捕捉从敏感到耐药的蛋白表达变化，揭示耐药机制，如发现 VEGF、MMPs 等血管生成相关蛋白上调与 ICB 耐药相关，为联合治疗提供依据；
治疗毒性监测：动态监测细胞因子变化，早期预测 CAR-T 治疗中的细胞因子释放综合征（CRS）等毒性反应；
肿瘤微环境解析：结合空间转录组等技术，解析肿瘤微环境中蛋白的空间分布与互作，如发现 CXCL10 与 CD8⁺T 细胞浸润的关联，为 "冷肿瘤" 转化提供靶点。
Olink 蛋白组学技术凭借高灵敏度、高通量和微量样本兼容的优势，在肿瘤免疫治疗研究中展现出独特价值，其应用贯穿生物标志物发现、疗效预测和机制解析全过程。Olink 蛋白组学检测服务流程从样本提交到生物信息分析的完整解决方案。通过解析循环蛋白与肿瘤 - 免疫微环境的关联，Olink 技术为突破免疫治疗应答率瓶颈提供了重要支撑。未来，随着检测面板的扩展和多组学整合，Olink 技术将进一步推动肿瘤免疫治疗进入精准化时代，通过个体化蛋白谱分析实现治疗方案的优化与动态调整。
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