引言
狼疮肾炎（LN）作为系统性红斑狼疮（SLE）最严重的器官并发症之一，是慢性肾脏病（CKD）的重要诱因，其传统诊断手段存在显著局限：尿检指标难反映病理活动，肾活检作为有创 “金标准” 易致肾损伤且无法动态监测。开发微创、高特异性的血清生物标志物，成为 LN 临床研究的核心需求。抗体芯片技术原理是基于特异性抗体-抗原结合进行高通量蛋白检测。
抗体芯片技术依托抗原 - 抗体特异性结合原理，可在微升级血清样本中同步检测数十至数百种蛋白，兼具高通量、高敏感性与样本经济性优势，为 LN 生物标志物初筛提供理想解决方案。2023 年 9 月，美国休斯顿大学 Tianfu Wu 教授团队在《Arthritis & Rheumatology》（IF:13.3）发表的研究中，以抗体芯片为核心工具，成功发现 V-set 含免疫球蛋白结构域蛋白 4（VSIG4）可作为 LN 及肾脏病理活动的新型血清标志物，为 LN 无创诊疗提供新方向。
一、研究基础：LN 诊断困境与抗体芯片技术适配性
1.1 LN 临床诊断的核心痛点
约 50%-60% SLE 患者会出现 LN，病理以免疫复合物沉积引发的肾炎症为主，临床表现为蛋白尿、肾功能下降。传统诊断依赖两类指标：功能性指标（如血清肌酐）仅反映肾损伤结果，无法早期提示病理活动；肾活检虽精准，但有创且不适用于动态监测。此外，anti-dsDNA 抗体、补体 C3/C4 等传统指标特异性不足，与肾脏病理活动相关性弱，难以指导治疗调整。
1.2 抗体芯片技术的独特优势
基于体液的生物标志物具有微创、可重复检测的优势，但传统单指标筛选效率低。抗体芯片可同步定量多种蛋白，单次实验覆盖数十种靶点，检测限达 pg/mL 级别，且仅需微升级血清，完美适配 LN 血清标志物的高通量初筛需求，能快速从复杂蛋白组中锁定潜在靶点。
二、抗体芯片初筛：锁定 VSIG4 等候选标志物
2.1 初筛实验设计
研究团队构建小样本初筛队列：4 例活动性 LN 患者与 4 例年龄、性别、种族匹配的健康对照，采用覆盖 40 种高丰度血清蛋白（涉及免疫调节、炎症反应）的抗体芯片检测，通过 t 检验比较两组蛋白表达差异。
2.2 初筛结果
(如图1A所示)分析显示两组蛋白表达谱差异显著，使用热图（图1B）对8名受试者血清中40个血清蛋白的表达水平进行分析和可视化（图1B）,统计学结果表明：13 种蛋白(图1C中红色部分)在活动性 LN 患者血清中显著升高（P<0.05），2 种蛋白（HSPG2、PRSS1）显著降低；其中 VSIG4 上调幅度最大（较健康对照高 11.33 倍），且经蛋白质相互作用网络分析（Cyto-Hubba 工具），其为连接度最高的 “枢纽基因”(图1D）。结合文献回顾，排除 MRC1、PRTN3 等已知 LN 相关蛋白后，研究团队将 VSIG4、SPARCL1、CTSZ 等 8 种未报道蛋白列为后续验证靶点。
图1 定量抗体阵列对差异表达蛋白进行鉴定
三、ELISA 验证与机器学习：确定核心标志物
3.1 扩大队列 ELISA 验证
构建 81 人验证队列（34 例活动性 LN、12 例非活动性 LN、13 例 CKD 对照、22 例健康对照），如图2A所示,ELISA 结果显示：VSIG4、CPA1 等 6 种蛋白在 LN 患者血清中显著高于健康对照；VSIG4、SPARCL1 可区分 LN 与 CKD 对照；VSIG4、CTSZ、SPARCL1、MCAM 在活动期与非活动期 LN 间差异显著，提示与疾病活动度相关。
3.2 机器学习排序标志物优先级
以 46 例 LN 患者与 22 例健康对照的 8 种蛋白水平为特征，构建随机森林分类模型，300 次迭代后中位 AUC 达 0.90（图2B）；通过 “树重要性” 与 “排列重要性” 评分，如图2C所示，VSIG4、SPARCL1、CTSZ 排名前三，最终确定这 3 种蛋白进入确认实验。
图2 ELISA对LN患者8种差异表达蛋白的验证
四、VSIG4 诊断效能与病理相关性：多维度验证
4.1 大样本队列诊断效能评估
155 人确认队列（65 例活动性 LN、35 例非活动性 LN、13 例 CKD 对照、42 例健康对照）（图3A）的 ROC 曲线分析显示（图3B）：VSIG4 区分 LN 与健康对照的 AUC 达 0.93，区分活动期与非活动期 LN 的 AUC 为 0.79，均优于 SPARCL1、CTSZ 及传统指标（anti-dsDNA AUC=0.70、C3 AUC=0.70、C4 AUC=0.57）；SPARCL1 区分 LN 与 CKD 对照的 AUC 为 0.85，表现最佳。
图3 LN患者三个潜在的新的生物标志物
4.2 VSIG4 病理定位与临床关联
免疫组化显示：IV 级 LN 患者肾小球、肾小管中 VSIG4 表达显著高于健康对照，提示其参与肾脏局部炎症；相关性分析表明：血清 VSIG4 水平与 SLEDAI、rSLEDAI、尿蛋白定量等临床指标，及肾脏病理活动指数（AI）、毛细血管内皮增生等病理指标均呈显著正相关（P<0.01），证实其可反映肾脏病理活动度。
五、技术展望与结论
该研究证实抗体芯片在 LN 标志物发现中的核心价值：通过 “初筛 - 验证 - 功能分析” 链条，高效锁定 VSIG4 这一核心标志物。未来，随着抗体芯片通量与灵敏度提升，结合多组学技术，有望开发多标志物联合检测面板，推动 LN 无创精准诊疗。抗体芯片技术服务， 提供专业的抗体芯片技术服务，助力科研发现
综上，抗体芯片技术为自身免疫性疾病标志物研究提供关键工具，VSIG4 的发现为 LN 诊断与病理评估带来新突破，为临床诊疗与基础研究提供重要参考。
乐备实是国内专注于提供高质量蛋白检测以及组学分析服务的实验服务专家，自2018年成立以来，乐备实不断寻求突破，公司的服务技术平台已扩展到单细胞测序、空间多组学、流式检测、超敏电化学发光、Luminex多因子检测、抗体芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、多色免疫组化等30多个，建立起了一套涵盖基因、蛋白、细胞以及组织水平实验的完整检测体系。
我们可提供从样本运输、储存管理、样本制备、样本检测到检测数据分析的全流程服务。凭借严格的实验室管理流程、标准化实验室操作、原始数据储存体系以及实验项目管理系统，已经为超过3000家客户单位提供服务，年检测样本超过100万，受到了广大客户的信任与支持。
沪公网安备31011502400759号
营业执照(三证合一)
