一、技术原理与核心机制

流式液相芯片技术（Cytometric Bead Array，CBA）是基于流式细胞检测平台的多重蛋白定量方法。该技术通过将特异性捕获抗体共价交联于具有不同荧光强度的微球表面，形成差异化的捕获微球群体。在检测过程中，这些微球与待测样本共同孵育，微球表面的捕获抗体与样本中相应抗原结合后，再加入荧光标记的检测抗体，最终形成"三明治"免疫复合物。

通过流式细胞仪分析，系统可同时识别微球编码荧光和检测荧光信号，实现对待测样本中多个蛋白指标的同步定量。每个荧光编码微球相当于一个独立的检测单元，其检测原理类似于传统ELISA，但凭借流式细胞仪的高灵敏荧光检测能力，显著提升了检测性能。

二、技术优势与性能特点

多重检测能力

1. 单次检测最多可同时定量75种蛋白指标

2. 仅需50μL样本即可完成全面分析

3. 检测灵敏度达pg/mL级别

4. 动态范围覆盖0-5000 pg/mL

操作效率提升

1. 实验流程仅需3.5小时

2. 所有检测指标共享标准曲线

3. 支持96孔板和384孔板操作模式

4. 自动化数据分析软件提高工作效率

质量控制优势

1. 荧光信号检测避免酶联放大假阳性

2. 液相反应体系提高结合效率

3. 标准化的质控流程确保结果可靠性

三、标准化操作流程

样本前处理

1. 细胞培养上清：离心去除细胞碎片

2. 血清/血浆样本：避免反复冻融

3. 标准品配制：轻柔重悬，避免剧烈振荡

实验操作步骤

1. 捕获微球混合液的制备与验证

2. 样本与微球共同孵育（避光条件）

3. 荧光检测抗体添加与反应

4. 流式细胞仪上机检测

5. 专业软件数据分析

关键质控环节

1. 微球混匀：防止聚集，确保分散均匀

2. 避光操作：保护荧光信号稳定性

3. 仪器校准：优化荧光补偿参数

4. 标准曲线：确保定量准确性

四、常见问题与解决方案

信号检测异常

1. 荧光信号弱：检查抗体活性，优化孵育条件

2. 背景信号高：适当稀释样本，优化洗涤步骤

3. 微球聚集：充分振荡混匀，调整上样浓度

标准品处理

1. 标准品现配现用，避免反复冻融

2. 轻柔重悬，防止蛋白降解

3. 严格按说明书进行系列稀释

数据分析要点

1. 使用专用分析软件处理复杂数据

2. 避免标准曲线外推导致的误差

3. 注意不同样本类型的基质效应

五、应用范围与注意事项

适用样本类型

1. 细胞培养上清液

2. 血清、血浆样本

3. 其他体液样本

技术局限性

1. 与ELISA结果不可直接比较

2. 某些低丰度蛋白仍需优化检测条件

3. 需要专门的流式细胞检测设备

优化建议

1. 新型样本建议进行预实验确定稀释倍数

2. 建立实验室内部质控体系

3. 定期进行仪器性能验证

六、技术发展前景

CBA技术作为连接流式细胞术与蛋白定量的重要桥梁，在多重检测领域展现出显著优势。随着新型微球编码技术的开发和检测通量的不断提升，该技术将在免疫监测、疾病标志物发现和药物研发等领域发挥更重要的作用。未来与自动化平台的整合将进一步提高其在临床研究和基础研究中的应用价值。

七、CBA流式液相技术服务哪里有？

乐备实（LabEx）提供CBA流式液相技术服务

乐备实是国内专注于提供高质量蛋白检测以及组学分析服务的实验服务专家，自2018年成立以来，乐备实不断寻求突破，公司的服务技术平台已扩展到单细胞测序、空间多组学、流式检测、超敏电化学发光、Luminex多因子检测、抗体芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫组化、DSP空间多组学等30多个，建立起了一套涵盖基因、蛋白、细胞以及组织水平实验的完整检测体系。

  
我们可提供从样本运输、储存管理、样本制备、样本检测到检测数据分析的全流程服务。凭借严格的实验室管理流程、标准化实验室操作、原始数据储存体系以及实验项目管理系统，已经为超过3000家客户单位提供服务，年检测样本超过100万，受到了广大客户的信任与支持。