一文搞定细胞因子检测:常用方法合集速递
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细胞因子(cytokine,CK)是由免疫细胞(单核细胞、巨噬细胞、T/B 细胞、NK 细胞等)与非免疫细胞(内皮细胞、表皮细胞、成纤维细胞等)合成分泌的小分子蛋白质,具备广泛生物学活性。其通过结合特异性受体,调控细胞生长分化、免疫应答等关键过程,通常由免疫原、丝裂原或其他刺激剂诱导产生,功能涵盖固有免疫与适应性免疫调节、血细胞生成、APSC 多能细胞调控及损伤组织修复等。依据功能特性,细胞因子可划分为白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子超家族、集落刺激因子、趋化因子、生长因子等多个家族,是维持人体稳态、抵御疾病的核心调节分子。

在临床场景中,细胞因子检测可广泛应用于疾病辅助诊断与预后评估、感染源鉴别、细胞因子风暴预警、肿瘤免疫机制研究、自身免疫性疾病病情监测及药效评估,同时能实时追踪放化疗、免疫治疗或术后的炎症进展、转归及治疗效果;在生物药研发领域,该检测可助力免疫原性评估、药物活性检测、药物相互作用研究及安全性评价等核心环节。
可见,细胞因子检测是生物医药领域不可或缺的关键技术,对疾病诊断治疗、药物研发创新均具有重要支撑意义。目前科研人员已开发多种检测方法,以下为常用技术汇总:
 
1、酶联免疫吸附法(ELISA,Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)
作为免疫学检测领域的经典技术,ELISA 专为体液中细胞因子等微量蛋白质检测设计,核心原理是将抗原 / 抗体固定于固相载体并保留其免疫活性,通过酶标记抗原 / 抗体的特异性结合反应,最终以显色信号定量目标分子。该技术兼具高灵敏度、强特异性、操作便捷及可自动化优势,不仅能精准检测细胞因子的含量、亚型与受体表达,还可支撑细胞因子分泌机制及功能研究,同时适用于核酸、脂质等其他生物分子检测,广泛应用于临床诊断、生物药研发、食品安全等多个领域。
    
2、酶联免疫斑点技术(ELISPOT,Enzyme-linked ImmunoSpot)
作为 ELISA 技术的进阶升级方案,ELISPOT 是聚焦单个分泌细胞的定量检测核心技术 —— 依托免疫吸附与细胞培养技术融合,将目标细胞接种于包被特异性抗体的 96 孔板,经刺激后细胞分泌的细胞因子或免疫球蛋白会被原位捕获;移除细胞后,通过生物素标记二抗、酶标亲和素孵育及底物显色,单个分泌细胞会形成特征性染色斑点,实现可视化定量。
该技术兼具超高灵敏度、操作便捷、成本可控等优势,不仅能精准检测单个细胞分泌细胞因子 / 免疫球蛋白的频率,动态监测样本中活细胞免疫状态,还可对於抗原刺激后的活细胞进行功能性验证,凭借特异性强、结果直观可信的核心特点,广泛应用于分泌细胞因子细胞检测、抗体分泌细胞(ASC)测定等场景,成为国内外免疫学界公认的核心检测技术之一。
     
3、蛋白质印迹法(Western Blot,WB)
作为蛋白分析领域的经典常规技术,WB 专为细胞 / 组织中特定蛋白质表达检测设计,核心原理是将样品经凝胶电泳分离后转印至固相膜,通过特异性抗体与目标蛋白的免疫结合反应,结合显色或化学发光检测,依据条带位置与灰度值,实现蛋白的定性鉴定及半定量分析。
该技术流程清晰(含电泳分离、转膜、免疫印迹、显色等关键步骤),兼具高分辨率与强特异性优势,可同时对比多个样品中同种蛋白的表达量差异,广泛应用于基因蛋白水平表达研究、抗体活性检测、疾病早期诊断等生物医药研究及临床相关场景。
 
4、超敏电化学发光技术(MSD,Meso Scale Discovery)
作为生物分子检测领域的超高灵敏度技术,MSD 以电化学发光为核心原理 —— 通过电化学信号激发特异性标记物产生强光信号,结合信号放大机制实现对低浓度目标分子的精准捕获,尤其适用于生物标志物等微量生物分子检测。
该技术兼具高灵敏度、宽线性范围、强特异性及低背景干扰等核心优势,更支持多靶点并行检测,能高效实现低丰度目标分子的定量分析,在生物标志物筛查、药物高通量筛选及免疫分析等场景中表现突出。目前已广泛应用于临床诊断与生物医药研究:临床端可精准检测肿瘤、感染性疾病、心血管疾病等标志物,为诊疗决策提供可靠依据;研发端可支撑生物分子互作研究、新药活性评价及免疫学机制解析,为新药研发与基础科研提供关键技术支撑。
 
5、Luminex 液相芯片检测技术
作为多因子检测领域的核心技术,Luminex 融合微球编码与流式细胞仪原理,通过微球内部三种免疫荧光的不同配比,可实现数百种特异性微球的精准区分,每种微球均能靶向捕获一种目标蛋白。检测时,仪器通过双激光系统完成定性与定量分析:635nm 红色激光识别微球编码,明确对应靶标类型;532nm 绿色激光检测 PE 荧光基团信号强度,精准反映靶标蛋白结合量。
该技术兼具多重检测优势与超高灵敏度,既实现 pg 级绝对定量(性能媲美多重 ELISA),又支持单次实验同时检测多种蛋白指标,大幅提升检测效率与样本利用率。配套试剂盒覆盖人类、非人灵长类、小鼠、大鼠、犬、猪等多个物种,广泛适用于多因子联合检测、生物标志物筛查、药物研发等生物医药研究场景。
   
6、Olink 技术
作为突破蛋白检测多重性、特异性与灵敏度瓶颈的核心平台,Olink 聚焦超灵敏多重蛋白标志物检测、无偏靶向蛋白质组学及精准蛋白组学三大核心方向,通过技术创新推动蛋白标志物发现、药物研发、转化医学研究及多组学整合的落地应用。
该平台检测服务兼具高灵敏度、强稳定性与高准确性优势,配套超微量蛋白标志物开发、蛋白互作分析等多元化方案,可适配精准医疗、转化医学、药物研发等广泛研究场景。同时,其在生物标志物筛查、疾病预测诊断等领域的应用,为临床诊疗决策与科研创新提供高效技术支撑,加速医学研究向临床转化的进程。
 
7、Cytometric Bead Array(CBA)系统
作为流式细胞术与蛋白定量技术的融合创新,CBA 系统是针对微量样本设计的多指标检测技术,核心原理是利用微米级荧光编码微球 —— 每种微球偶联特异性抗体,与样本中目标细胞因子 / 蛋白质结合形成免疫复合物,经洗涤去除未结合成分后,通过流式细胞仪实现精准检测。
该技术兼具多重检测与高效分析优势:单次实验可同步定量单个样本中多种指标,且具备高灵敏度、强特异性特点,同时操作快速简便、检测通量高,成为免疫学研究与临床诊断的关键工具。临床端可精准检测免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤等疾病标志物,支撑早期诊断、病情监测及疗效评估;研发端可助力细胞因子表达规律、分子互作机制及疾病关联研究,为新药研发与免疫学基础研究提供可靠数据支撑。
 
8、质谱法(Mass Spectrometry,MS)
作为蛋白分析领域的高分辨率技术,MS 通过质谱仪精准测量离子质荷比,可直接获取细胞因子的分子量、氨基酸序列等核心信息。其核心优势在于兼具超高灵敏度、强特异性与高分辨率,既能实现低浓度细胞因子的精准检出,又能有效区分不同细胞因子的结构差异,为蛋白鉴定与特性分析提供直接依据。
   
综上,细胞因子检测是贯穿生物医药领域的关键技术支撑,广泛赋能疾病诊断监测、治疗预后评估、药物研发筛选、疫苗设计评估及基础机制研究等核心场景。伴随检测技术的持续迭代与应用场景的不断拓展,细胞因子检测必将在未来生物医药领域中发挥更为核心的引领作用。
 
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产品名 货号 检测因子数 指标
小鼠炎症10因子Panel LXLBM10-1 10 IL-1 β/IL-1F2,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6 ,IL-10,IL-12p70,CXCL1/GRO/α/KC/CINC-1,IFN-γ,TNF-α
人炎症10因子Panel LXMH10-1 10 IFN-γ,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12p70,IL-13,TNF-α

 

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基因水平:PCR Array、RT-PCR、PCR、单细胞测序
蛋白水平:MSD、Luminex、CBA、Elispot、Antibody Array、ELISA、Sengenics
细胞水平:细胞染色、细胞分选、细胞培养、细胞功能
组织水平:空间多组学、多重荧光免疫组化、免疫组化、免疫荧光
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