1. ChREBP 是调控糖代谢、脂肪生成的糖响应元件结合蛋白，以往研究多局限于代谢领域（覆盖肿瘤 / 非肿瘤疾病），而本文首次直接锚定其与肿瘤免疫逃逸的关联，创新点拉满；
2. 肿瘤代谢重编程研究多扎堆糖酵解，但胆碱代谢的相关探索本就稀缺，更别说它在 “肿瘤 - 免疫互作” 中的功能了，这一方向本身就自带新意；
3. 研究思路是教科书级的：先借公共数据库锁定关键基因，再通过体内外实验做功能 + 机制验证（还叠加了转录组、脂质代谢组等多组学分析），最后落地临床样本验证，逻辑闭环相当扎实

题目：ChREBP 介导胆碱剥夺与趋化因子分泌，重塑肿瘤相关巨噬细胞并促进免疫逃逸

设计思路

1、关键分子筛选：ChREBP 与 CRC 不良预后及 “免疫荒漠” 表型密切相关

 

2、ChREBP 调控趋化因子生成与胆碱代谢，招募 TAMs 促进肿瘤免疫逃逸

对 ChREBP 敲除组与对照组肿瘤进行 RNA-seq 分析，共鉴定出 1102 个差异表达基因（DEGs）。其中下调基因显著富集于 “趋化因子信号通路”“TNF-α 信号通路” 等免疫相关通路，且巨噬细胞招募关键趋化因子（CCL2、CCL5、CCL7）在 ChREBP 敲除肿瘤中表达明显降低。流式细胞术与免疫荧光（IF）验证显示，ChREBP 敲除后，肿瘤内免疫抑制性 M2 型 TAMs（CD206⁺、ARG1⁺）浸润减少，而免疫刺激性 M1 型 TAMs（iNOS⁺、CD86⁺）浸润增加，证实 ChREBP 可通过调控趋化因子生成，定向招募 M2 型 TAMs 以构建免疫抑制性肿瘤微环境。

 

3、胆碱代谢重编程诱导巨噬细胞向免疫刺激表型极化

已知 ChREBP 在脂质代谢调控中发挥关键作用，对 MC38 肿瘤的脂质代谢组学分析显示，ChREBP 敲除肿瘤中磷酸胆碱及胆碱衍生物含量显著下降，而对照组肿瘤中胆碱代谢通路高度富集。进一步研究发现，小鼠结直肠癌细胞的胆碱消耗量显著高于巨噬细胞，提示肿瘤细胞可通过 ChREBP 介导胆碱剥夺影响巨噬细胞功能。

体内实验表明，给荷瘤小鼠喂食 1% 胆碱饮食，可显著抑制肿瘤生长，增加 CD8⁺T 细胞和 M1 型 TAMs 浸润，且与 ChREBP 敲除具有协同抗肿瘤效应。体外实验进一步证实，胆碱可提高 M1 型巨噬细胞中线粒体活性氧（mitoROS）的产生，诱导细胞色素 c 或线粒体 DNA（mtDNA）释放，进而激活 cGAS-STING 通路，最终促进 M1 型标志物（IL-1β、IFN-β）表达升高，抑制 M2 型标志物表达，明确胆碱对巨噬细胞向免疫刺激表型极化的诱导作用。

 

4、肿瘤细胞通过 ChREBP 介导的胆碱竞争与 SP1 协同调控，驱动 TAMs 重编程及免疫逃逸

胆碱的体内获取主要依赖转运蛋白 SLC44A1 或 SLC5A7，作者通过对比 TAM1 细胞与 MC38 肿瘤细胞中关键分子表达，发现 MC38 细胞的 ChREBP 与 SLC44A1 基因表达水平显著高于 TAM1 细胞。进一步的体内外实验证实，肿瘤细胞可通过高表达 ChREBP/SLC44A1 复合物，与 TAM1 细胞竞争性摄取胆碱，实现对肿瘤微环境中胆碱资源的优先占据，为后续 TAMs 重编程奠定代谢基础。

 

5、ChREBP 与 SP1 互作，协同激活趋化因子及胆碱代谢相关基因转录

借助质谱（MS）分析筛选 ChREBP 相互作用蛋白，鉴定出 NME2、SP1、CEBPZ 等候选转录因子，功能验证明确 SP1 是 ChREBP 发挥调控作用的关键互作伙伴。染色质免疫沉淀（ChIP）实验显示，ChREBP 可显著增强 SP1 与趋化因子基因（CCL2）及胆碱代谢相关基因（SLC44A1、CHKA）启动子区域的结合能力，进而促进这些基因的转录表达，形成 “代谢调控 + 免疫招募” 的双重调控网络，最终推动 TAMs 重编程及肿瘤免疫逃逸。

 

6、ChREBP 低表达提升抗 PD-L1 治疗响应，靶向 ChREBP-SLC44A1 轴为结直肠癌免疫治疗增效

ChREBP 表达水平与抗 PD-L1 治疗应答密切相关 —— 在结直肠癌小鼠模型及临床癌症患者中，低 ChREBP 表达均预示着对 PD-L1 抑制剂的治疗反应更优。

鉴于 ChREBP 缺失可增强 CD8⁺T 细胞的抗肿瘤效应，作者推测 ChREBP 缺陷型细胞与抗 PD-L1 抗体的联合疗法可能产生协同增效作用。为验证该假设，对携带 MC38 肿瘤的 C57BL/6 小鼠开展单药（抗 PD-L1 抗体）与联合治疗实验，结果证实抑制 ChREBP 能显著提升抗 PD-L1 免疫疗法在结直肠癌小鼠模型中的治疗效果。

进一步通过检测结直肠癌（CRC）患者的胆碱水平与免疫治疗响应，不仅明确了 ChREBP 在肿瘤免疫逃逸中的核心作用，更凸显了靶向 ChREBP-SLC44A1 轴以增强结直肠癌免疫治疗疗效的临床转化潜力。

 

这篇研究内容详实、逻辑严谨，遵循 “公共数据筛选关键分子→体内外功能验证→多组学解析通路→深挖分子机制→验证治疗转化” 的经典顶刊思路，且干湿实验结合，囊括多个国自然热点方向。

 

参考文献：

Zhao, Jianhong et al. “ChREBP-Mediated Choline Deprivation and Chemokine Secretion Shape Tumor-Associated Macrophages to Promote Immune Evasion.” Cancer research vol. 85,23 (2025): 4701-4717. doi:10.1158/0008-5472.

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