实操指南:仅需 60-110 μL 样本,一次性测通多细胞因子/趋化因子/生长因子等
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样本量少仅几十 ul,想测的指标又不少,一次测全,又怕方案不靠谱?

如果你正在考虑 Luminex / MSD / Olink / CBA / ELISA 等多因子或单因子检测,这篇将帮你一次性理清下单前的所有关键问题。

  

一、样本相关

Q1 :做多因子检测,每个样本最少需要多少样本量?

一般 Luminex / MSD / Olink / CBA一般建议60 μL / 样本;

单因子ELISA一般建议110 μL / 样本

  

Q2 :哪些样本类型可以做多因子检测?你们经验咋样?

这些全部都做过:

Q3: 样本需要怎么处理和保存?

采集后尽快离心取上清,-80℃ 保存,避免反复冻融,运输建议干冰;具体可以和我们沟通,有具体操作样本指南

  

Q4 :样本已经冻了很久了,还能测吗?

按经验6个月内影响不大,不过具体要看样本特异性,这篇文章可以参考,时间对因子降解的影响;BMC Immunol. 2009 Sep 28;10:52.

  

二、指标 & 方案设计

Q5 :我给你提供我项目需求相关的一串因子能不能一起测啊?我想省钱。

优先匹配固定 Panel,做的最多,最成熟,如果覆盖不了就定制组合,我们会尽量把多个指标放进一个盒子里同时检测(排除因子干扰),给老师节省预算;原则:能合就不拆,节省样本和成本

  

Q6: 哪些指标不适合多因子?

分泌型蛋白:适合;

膜蛋白 / 胞内蛋白:不适合

  

三、实验设计 & 板位规划

Q8:我样本数量少、预算也不足,做不了一整个盒子怎么办?

可以做拼板(和其他老师的项目一起拼一个盒子),10个孔起做,节省成本;

 

Q9:一块板能测多少样本?

一般约 72 个孔(扣除双标曲16个和预实验的孔位8个)

  

Q10 :预实验一定要做吗?

强烈建议,不同刺激条件差异大,除了试剂盒推荐的稀释倍数之外,为了对老师的数据负责,建议做,一般占一排,所以建议预留 8 个孔给预实验

  

Q11 :多块板如何一起分析?

一般可以设置桥接样本,每块板加入 2 个相同样本,用于板间校正;

  

Q12 :不同批次怎么办?

尽量同一批测,如果项目设计就是要分开不同批次,和Q10逻辑一致,每批保留同一桥接样本

  

四、数据与分析

Q13不会分析怎么办?

Labex提供标准化、统计、可视化支持,结果可直接用于文章

  

Q14没有分析平台?方便我不定时自己操作出图的?

有,免费线上分析云平台+操作使用视频,方便老师随时使用出图。


 

乐备实(上海优宁维生物科技股份有限公司旗下全资子公司),是国内专注于提供高质量蛋白检测以及组学分析服务的实验服务专家,自2018年成立以来,乐备实不断寻求突破,公司的服务技术平台已扩展到单细胞测序、空间多组学、流式检测、超敏电化学发光、Luminex多因子检测、抗体芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫组化、DSP空间多组学等30多个,建立起了一套涵盖基因、蛋白、细胞以及组织水平实验的完整检测体系。

 
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