微球免疫分析技术CBA(Cytometric Bead Array)概述
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一、原理概述

微球免疫分析技术CBA(Cytometric Bead Array)是一种基于流式细胞术原理的高通量多重蛋白检测技术。该技术以微米级荧光编码微球为载体,通过在其表面固定特异性抗体,实现对多种目标分析物(如细胞因子或特定蛋白质)的高选择性识别与定量。其基本操作流程主要包括以下四个步骤:

1. 微球与样本孵育
将具有不同荧光编码的捕获微球与待测样本混合。不同微球表面包被的特异性抗体可分别识别不同目标分子,其荧光编码特征可在后续检测中实现精准区分。

2. 免疫复合物形成
样本中的目标分析物与对应微球表面的特异性抗体结合,形成抗原-抗体免疫复合物。

3. 信号放大与标记
洗涤去除未结合成分后,加入荧光标记的检测抗体,与免疫复合物中的目标分子结合,形成双抗体夹心结构,实现信号放大与标记。

4. 流式细胞术检测与分析
通过流式细胞仪对微球进行多参数检测:一方面根据荧光编码区分微球类型,另一方面通过检测荧光信号强度对目标分析物进行定量分析。结合标准曲线,可准确计算出样本中目标蛋白质的浓度。

CBA技术的主要优势在于可同时检测同一样本中的多种目标分子,兼具高灵敏度与高通量特性,已在基础研究与临床分析中广泛应用。

              

二、技术特点:与ELISA方法的比较

CBA技术作为一种整合了酶联免疫吸附测定(ELISA)与流式细胞术优势的液相蛋白检测平台,相较于传统ELISA方法具有以下显著特点:

1. 高效捕获与多重分析能力
CBA采用悬浮态捕获微球,其在液相中与样本充分接触,相比ELISA的固相包被模式,能够更高效地捕获目标分析物。结合流式细胞术的宽动态检测范围,该技术最多可同时对同一份样本中的75种蛋白进行精确定量。

2. 高灵敏度与宽检测范围
CBA的分析灵敏度可达pg/mL级别(如2.8 pg/mL),检测动态范围通常覆盖0–5000 pg/mL。该技术基于荧光信号直接定量,有效避免了ELISA中酶联放大过程可能引入的非特异性干扰,显著提高了检测的特异性和重复性。

3. 样本需求量少且操作便捷
每次检测仅需约50 μL样本,采用集成化设计,仅需一组标准曲线即可完成多种蛋白的浓度计算。整个操作流程可在约3.5小时内完成,显著提高了检测效率。

4. 检测组合灵活可定制
通过CBA Flex Set体系,用户可根据实验需求灵活组合不同捕获微球,实现多指标的自定义多重检测。该系统配有专用分析软件,支持96孔板及384孔板的高通量操作,广泛适用于免疫应答、细胞信号传导、细胞凋亡等研究领域。

5. 专业数据分析系统支持
配套的BD CBA软件具备强大的数据处理功能,可将荧光信号直接转换为蛋白浓度,并提供可视化分析图形,支持多平台操作系统,便于用户进行深度数据解读与结果分析。

总结
相较于传统的ELISA技术,CBA实现了从单一指标检测向多重同步分析的跨越,在检测通量、灵敏度、样本利用效率及操作灵活性等方面均具有显著优势,为蛋白质组学研究和临床生物标志物分析提供了重要的技术支持。

        

三、技术优势与应用范围

(一)技术优势

👉高灵敏度与低样本需求
单次检测仅需25–50 μL样本,灵敏度可达pg/mL级别(如0.274 pg/mL),适用于样本量有限的实验条件。

👉操作简便快速
实验步骤集成度高,常规流程仅需3–4小时即可完成,并可支持高通量上样模式,有效提升检测效率。

👉多重检测与良好的重复性
支持弹性实验设计,可同时对多达30种目标蛋白进行定量分析。系统稳定性强,实验重复性高,满足多指标并行检测需求。

👉结果分析便捷高效
配合专用分析软件(如FCAP Array),可对不同规模的样本数据进行快速自动化处理与分析,简化数据解读流程。

(二)适用样本类型

CBA技术广泛适用于多种生物样本类型,主要包括:

👉体液样本:血清、血浆、唾液、泪液、房水、体腔灌洗液等;

👉体外培养样本:细胞培养上清、细胞裂解液等;

👉组织样本:经适当处理后亦可进行检测。

(三)应用领域

CBA技术在生物医学研究与临床实践中具有广泛的应用前景,主要包括以下方向:

👉药物与疫苗研发
用于药效评价、药物筛选、疫苗免疫效果评估以及免疫功能检测。

👉疾病研究与临床辅助
适用于感染性疾病机制研究、辅助诊断与疗效监测,以及在干细胞研究与细胞治疗评估中的应用。

👉细胞功能与信号传导研究
可用于细胞信号通路中磷酸化蛋白的定量分析,以及凋亡相关蛋白的表达检测。

👉肿瘤与免疫学研究
在肿瘤发生机制探索、辅助诊断、疗效及预后评估中发挥重要作用,同时也可用于免疫相关疾病的研究、诊断与病程监测。

     

四、流式液相(CBA)检测服务哪个公司提供?

LabEx为您提供专业、高效的多重流式液相(Cytometric Bead Array,CBA)检测服务。基于流式细胞术与微球编码技术,CBA可在单管中对同一样本中的多种可溶性蛋白(如细胞因子、趋化因子、磷酸化信号蛋白等)进行同步、定量检测,兼具传统ELISA的特异性和流式技术的高通量优势。

货号 Panel名称 种属 检测指标
LXCBM06-1 CBA小鼠炎症6因子Panel Mouse IFN-γ,IL-10,IL-6,TNF,IL-12p70,MCP-1
LXCBM07-1 CBA小鼠炎症7因子Panel Mouse IFN-γ,IL-10,IL-2,IL-4,IL-6,IL-17A,TNF
LXCBH06-1 CBA人炎症6因子Panel 1 Human IL-10,IL-6,IL-1β,IL-8,TNF,IL-12p70
LXCBH06-2 CBA人炎症6因子Panel 2 Human IFN-γ,IL-10,IL-2,IL-4,IL-6,TNF

 

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