胸水样本多因子检测技术分析
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一、样本概述与临床意义

 

胸水,即胸腔积液,是积聚于胸膜腔内的病理性液体。作为一类重要的临床检验样本,胸水分析对多种疾病的诊断、鉴别诊断及治疗监测具有关键价值。通过对胸水进行多因子检测,即同时对样本中多种生物标志物(如细胞因子、肿瘤标志物、酶类、病原体核酸等)进行定量或定性分析,可全面评估胸腔内的病理生理状态。这种综合分析方法有助于区分积液性质(如渗出液与漏出液),鉴别感染性、肿瘤性、免疫性及心源性等多种病因,为精准医疗提供至关重要的实验室依据。

 

二、标准化取样流程

 

获取高质量、无污染的胸水样本是多因子检测结果准确可靠的前提,其操作需遵循严格的标准化流程。

 

1、术前评估与准备:操作前需通过影像学检查明确积液量与定位。向患者充分解释操作过程、必要性及潜在风险,获取知情同意。核对患者信息,准备无菌穿刺包、标本采集容器(包括无菌抗凝管、无添加剂的干燥无菌管、必要时专用的病原学培养瓶)及必要的急救药品与设备。

2、穿刺定位与消毒:患者通常取坐位,双臂置于床旁桌上。常用穿刺点为肩胛下角线第7-9肋间或腋中线第6-7肋间。以穿刺点为中心,使用消毒剂进行由内向外的广泛皮肤消毒,铺设无菌洞巾。

3、麻醉与穿刺取样:进行局部逐层浸润麻醉后,使用带三通阀的穿刺针沿肋骨上缘垂直缓慢刺入胸膜腔。确认进入胸腔后,连接注射器,缓慢抽取积液。首次引流量通常不超过50-100毫升,以避免因减压过快导致复张性肺水肿等并发症。若积液量多,可分数次抽取。

4、标本分装与标记:将抽取的胸水根据后续检测项目的不同要求,立即分装至相应容器中。用于常规生化、免疫学多因子检测的样本,建议使用EDTA抗凝管(用于细胞计数分类)和干燥无菌管(用于生化、肿瘤标志物等检测)。用于微生物学检查的样本需注入无菌瓶或血培养瓶。所有容器必须清晰标记患者唯一标识、样本类型及采集日期时间。

  

三、样本保存与运输规范

 

胸水样本成分复杂且不稳定,不当的保存与运输是导致检测前误差的主要因素。

保存条件

1、即时处理:样本采集后应尽快送检,理想状态下室温放置不超过1小时,以避免细胞溶解、细菌繁殖或生物活性物质的降解。

2、短期保存

  👉细胞学与细胞因子检测:若无法立即检测,用于细胞计数及分类的EDTA抗凝样本应在2-8°C条件下保存,但不宜超过24小时。用于特定细胞因子或炎症介质检测的样本,应根据检测试剂盒说明书要求,决定是否需要离心分离上清液,并将上清分装保存于-20°C或-80°C,避免反复冻融。

  👉生化与免疫检测:用于大多数肿瘤标志物、酶类、总蛋白等检测的样本,离心分离上清后,在2-8°C下可稳定保存数日(具体时间依项目而异),如需长期保存应置于-20°C以下。

  👉微生物学检测:应尽快处理,室温保存不应超过2小时。若需延迟,细菌培养样本可置于室温,病毒核酸检测样本通常建议2-8°C短期保存或-70°C以下长期保存。

运输要求:运输过程中需使用符合生物安全标准的防漏容器(三级包装),并附有完整的检验申请单。冷藏运输(2-8°C)适用于大多数检测项目。对于需冷冻保存的样本,应使用足量干冰或冰袋维持低温状态,并确保运输时间符合样本稳定性的要求。

 

四、多因子检测的预处理要点

 

检测前,样本需经过适当的预处理,以满足不同分析平台的进样要求。

 ✔️外观记录与混匀:首先观察并记录样本的物理性状(颜色、透明度、有无凝块)。轻轻颠倒混匀抗凝样本,确保细胞分布均匀。

 ✔️离心分离:对于需要检测上清液成分(如蛋白、小分子标志物)的项目,应在规定时间内,以适当的离心力(通常为1500-2000 g)离心10-15分钟,以彻底分离细胞及碎片。

 ✔️分装冻存:离心后,应立即将上清液分装至多个微量离心管中,体积以满足单次检测需求为宜。分装可最大程度减少因反复冻融导致的蛋白变性或生物活性丧失。

 ✔️细胞学样本制备:如需进行细胞病理学检查或流式细胞术分析,需对沉淀的细胞成分进行涂片、固定或特异性染色处理。

 

五、常见影响因素与质控考量

 

为确保多因子检测结果的准确性与可比性,必须关注以下关键环节:

 

影响因素

 👉血液污染:穿刺损伤血管导致的血性胸水,会显著影响多种生化指标(如pH值、葡萄糖)及肿瘤标志物的解读。

 👉凝块形成:未使用抗凝剂或抗凝不充分的样本出现凝块,会消耗大量细胞和蛋白,导致相关检测结果严重偏低。

 👉延迟送检与不当保存:如前所述,可导致细胞溶解、细菌过度生长或生物分子降解。

 👉药物治疗干扰:患者近期使用的药物(如抗生素、利尿剂、化疗药)可能直接或间接影响胸水中的某些成分浓度。

 

质量控制

 👉检测前:严格执行标准操作程序(SOP),加强人员培训,确保从医嘱申请、患者准备、样本采集、标识、运输到接收的全链条可追溯与标准化。

 👉检测中:采用经过验证的检测系统(如基于微球的多重免疫分析、电化学发光、高通量测序等),并定期进行仪器校准与维护。每批次检测应包含室内质控品,以监控精密度与准确度。

 👉检测后:建立合理的生物参考区间或临床决定水平。对异常结果进行复核,并结合患者临床表现、影像学及其他实验室检查结果进行综合解读。参与室间质量评价计划,是评估实验室间结果一致性的重要手段。

 

综上所述,胸水样本的多因子检测是一项系统工程,其临床价值的最大化依赖于规范化的取样、严格的保存运输、科学的预处理以及全过程的质量控制。唯有在分析前、中、后各阶段均实施精细化管理,才能确保所获数据的可靠性,从而为疾病的精准诊断与个体化治疗提供坚实支撑。

 

六、胸水用来做细胞因子检测,哪个公司有?

LabEx为您提供专业、高灵敏度的胸水(胸腔积液)细胞因子检测服务。胸水直接反映了胸膜腔局部微环境的炎症、免疫应答及病理状态,是鉴别良恶性积液、研究肺部及胸膜疾病机制的重要样本。我们采用优化的高特异性多重检测平台(如Luminex液相芯片或CBA流式液相技术),可对微量胸水样本中低丰度的关键细胞因子、趋化因子(如IL-6、IL-8、VEGF、TNF-α、IFN-γ等)进行同步、准确定量。

货号 Panel名称 种属 检测指标
LXLTM36-1 小鼠细胞因子/趋化因子-36因子Panel Mouse GM-CSF,IFN gamma,IL-1 beta,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-12p70,IL-13,IL-18,TNF alpha,IL-9,IL-10,IL-17A (CTLA-8),IL-22,IL-23,IL-27,G-CSF (CSF-3),IFN alpha,IL-3,IL-15/IL-15R,IL-28,IL-31,IL-1 alpha,LIF,ENA-78 (CXCL5),M-CSF,Eotaxin (CCL11),GRO alpha (CXCL1),IP-10 (CXCL10),MCP-1 (CCL2),MCP-3 (CCL7),MIP-1 alpha (CCL3),MIP-1 beta (CCL4),MIP-2,RANTES (CCL5)
LXLTH34-1 人细胞因子/趋化因子-34因子Panel Human GM-CSF,IFN gamma,IL-1 beta,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-8,IL-12p70,IL-13,IL-18,TNF alpha,IL-9,IL-10,IL-17A (CTLA-8),IL-21,IL-22,IL-23,IL-27,IFN alpha,IL-1 alpha,IL-1RA,IL-7,IL-15,IL-31,TNF beta,Eotaxin (CCL11),GRO alpha (CXCL1),IP-10 (CXCL10),MCP-1 (CCL2),MIP-1 alpha (CCL3),MIP-1 beta (CCL4),RANTES (CCL5),SDF-1 alpha
LXLBH27-1 人细胞因子-27因子Panel Human G-CSF,GM-CSF,IFN-γ,IL-10,IL-12(p70),IL-13,IL-17A,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8/CXCL8,MCP-1/CCL2,MIP-1β,TNF-α,IL-1Rα,IL-9,IL-15,FGF-basic,Eotaxin/CCL11,IP-10/CXCL10,MIP-1α/CCL3,PDGF-BB,RANTES,VEGF-A
LXLBH48-1 人细胞因子-48因子Panel Human β-NGF,CTACK/CCL27,Eotaxin/CCL11,FGF-basic,G-CSF,GM-CSF,GRO-α (Gro-a/KC/CXCL1),HGF,IFN-α2,IFN-γ,IL-1α,IL-1Rα,IL-2Rα,IL-1β,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8/CXCL8,IL-9,IL-10,IL-12(p40),IL-12(p70),IL-13,IL-15,IL-16,IL-17A,IL-18,IP-10/CXCL10,LIF,M-CSF,MCP-1/CCL2,MCP-3/CCL7,MIG,MIP-1α/CCL3,MIP-1β,MIF,PDGF-BB,RANTES,SCF,SCGF-β,SDF-1α,TRAIL,TNF-α,TNF-β,VEGF-A

 

乐备实(上海优宁维生物科技股份有限公司旗下全资子公司),是国内专注于提供高质量蛋白检测以及组学分析服务的实验服务专家,自2018年成立以来,乐备实不断寻求突破,公司的服务技术平台已扩展到单细胞测序、空间多组学、流式检测、超敏电化学发光、Luminex多因子检测、抗体芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫组化、DSP空间多组学等30多个,建立起了一套涵盖基因、蛋白、细胞以及组织水平实验的完整检测体系。

 
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